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独创性声明
第一章文献综述
第一篇生物大分子的分离与纯化
1.1生物大分子的分离与纯化研究概述
1.2色谱基本理论
1.3简易型色谱柱
第二篇 液相色谱法对还原变性牛胰岛的折叠特性的研究
1.4蛋白质的变性与复性
1.5蛋白质的复性机理
1.6液相色谱法对蛋白质的复性
1.7二硫键的正确对接
1.8胰岛素复性研究意义
参考文献
第二章疏水色谱法从猪心中分离纯化细胞色素-C
2.1概述
2.1.1生化药物的制备
2.1.2细胞色素C
2.2实验部分
2.2.1仪器和设备
2.2.2试剂与材料
2.2.3实验方法
2.3结果与讨论
2.3.1经典吸附层析法
2.3.2用简易型疏水色谱柱对细胞色素C的纯化
2.3.3纯度的检验
2.3.4 Cyt-C质量回收率的测定
2.3.5铁含量的测定
2.3.6紫外图谱比较
2.3.7制备规模的扩大与发展前景
2.4结论
参考文献
第三章体积排阻色谱法对还原变性胰岛素折叠特性的研究
3.1复性原理
3.2实验部分
3.2.1仪器和设备
3.2.2试剂与材料
3.2.3还原胍变,脲变Ins的配制
3.2.4用排阻色谱复性还原变性的Ins
3.2.5反相色谱法检验复性结果
3.2.6稀释法
3.3结果与讨论
3.3.1还原变性Ins在等度SEC上的色谱行为
3.3.2还原变性Ins在脲梯度复性中的色谱行为
3.3.3用反相色谱检验复性结果
3.4结论
参考文献
第四章疏水色谱法对还原变性胰岛素折叠特性的研究
4.1复性原理
4.1.1蛋白分子中的疏水作用力
4.1.2疏水色谱的折叠机理
4.2实验部分
4.2.1仪器和设备
4.2.2试剂与材料
4.2.3还原胍变,脲变Ins的配制
4.2.4用疏水色谱法复性还原变性的Ins
4.2.5反相色谱法检验复性结果
4.2.6稀释法
4.3结果与讨论
4.3.1流动相中GSH/GSSG的比率对还原变性Ins在疏水色谱上折叠行为的影响
4.3.2流动相中脲浓度对还原变性Ins在HIC上折叠行为的影响
4.3.3流动相中盐浓度对还原变性Ins在HIC上折叠行为的影响
4.3.4用反相色谱检验稀释法与疏水色谱法复性结果
4.4结论
参考文献
第五章离子交换色谱法对还原变性牛胰岛素折叠特性的研究
5.1复性原理
5.2实验部分
5.2.1仪器和设备
5.2.2试剂与材料
5.2.3还原胍变,脲变Ins的配制
5.2.4用离子交换色谱法复性还原变性的Ins
5.2.5稀释法
5.2.6紫外吸收光谱(UV)和荧光光谱(FR)
5.3结果与讨论
5.3.1进样量的选择
5.3.2流动相组成对还原变性Ins在离子交换色谱上色谱行为的影响
5.3.3 pH值对还原变性Ins在离子交换色谱上色谱行为的影响
5.3.4复性效果检验
5.3.5稀释法与色谱法比较
5.4结论
参考文献
致谢