直肠癌新辅助治疗中疗效判断相关的敏感生物学标志物研究

摘要

研究背景： 近年来直肠癌的新辅助治疗(neoadjuvanttherapy，NAT)越来越引起人们的重视，通过术前放疗、化疗可使肿瘤分期降低，为手术创造机会，增加保肛率，同时减少术中扩散和术后转移的风险。然而，直肠癌对术前放化疗的敏感性差异较大，相同的治疗方案，有的直肠癌敏感性较好，有的较差、甚至抵抗。检测直肠癌术前活检标本中血管内皮生长因子(VEGF)、细胞增生核抗原(Ki-67)的变化，从分子生物学方面深入研究新辅助放化疗对直肠癌的作用，为进一步提高直肠癌的治疗水平提供理论依据，进一步提高放化疗的疗效。 目的： 本研究拟在确定术前放化疗可以降低肿瘤分期的基础上，进一步研究其所引起的病理学改变，探讨VEGF、Ki-67在直肠癌中的表达及其与放化疗敏感性的关系，以期明确有关直肠癌放化疗敏感性的生物学标志物。术前放化疗敏感性的预测可以用来筛选最有可能从术前放化疗中获益的直肠癌患者，从而指导制定个体化的治疗方案，避免过度治疗。 材料与方法： 选择2003年1月-2007年11月山东省肿瘤医院收治符合标准的Ⅱ、Ⅲ期直肠癌患者32例入组，行三维适形放疗(3D-CRT)，采用6MVX线和15MVX线，常规分割，分四野照射，放疗总剂量DT40Gy，放疗的同时，行FolFox方案化疗2周期，放化疗结束后4～6周行手术治疗。在保证远端肠管2cm安全切缘的前提下，尽量采取低位前切除术。采用免疫组化二步法检测32例接受新辅助治疗的直肠癌活检标本及手术标本的VEGF、Ki-67的表达。采用双盲法，参照国际抗癌联盟(UICC)实体瘤的疗效评价标准，由病理科医生协助在400×镜下观察，进行结果判断。用TBS代替一抗作为阴性对照，用已知阳性切片作为阳性对照。按照世界卫生组织(WHO)分级观察毒副反应。对所得数据进行统计学分析，用SPSS13.0统计软件包进行卡方检验，按α=0.05作为检验水准，分析放化疗前后T分期、N分期的变化，放化疗前后VEGF、Ki-67的变化及其与放化疗敏感性的关系，得出结论。 结果： 1.新辅助治疗前后T分期、N分期的变化：薪辅助治疗后75％(24/32)的病例T分期下降，25％(8/32)的病例N分期下降。 2.VEGF、KI-67在直肠癌活检组织与术后标本中的表达情况：免疫组化标记显示VEGF阳性信号均位于细胞质，呈现粗大黄色颗粒，Ki-67阳性信号位于细胞核，32例直肠癌活检组织中VEGF强阳性表达13例，阳性表达6例，阳性率56.3％；新辅助放化疗后手术标本中VEGF强阳性表达23例，阳性表达4例，阳性率84.4％；放化疗前后VEGF的表达有显著差异(P＜0.05)；32例直肠癌活检组织中Ki-67高表达者16例，占50.0％，NAT后手术标本中Ki-67高表达者12例，占37.5％，放化疗前后Ki-67的表达有降低趋势，但无统计学意义。 3.直肠癌中VEGF、Ki-67的表达与临床病理的关系：VEGF在不同组织学类型直肠癌之间的表达情况无显著差异(P＞0.05)；在浸润至肌层与浸润至浆膜层的直肠癌之间VEGF的表达有显著差异(P＜0.05)；有淋巴结转移组与无淋巴结转移组之间VEGF的表达有显著差异(P＜0.05)，在性别、年龄及肿瘤大小的分组之间均无显著差异(P＞0.05)。Ki-67在有淋巴结转移组与无淋巴结转移组之间有显著差异(P＜0.05)，在年龄、性别、组织学类型、肿瘤大小及浸润深度分组之间，均无显著差异(P＞0.05)。 4.直肠癌VEGF、Ki-67的表达与放化疗敏感性的关系：统计结果显示：VEGF、Ki-67的表达均与放化疗的敏感程度有关(P＜0.05)，均表现出低表达者对放化疗敏感性好，高表达者对放化疗敏感性差、甚至抵抗，但VEGF和Ki-67两者无关(P＞0.05)。 结论： 1.直肠癌新辅助放化疗能使肿瘤体积缩小、减轻癌性粘连，降低肿瘤分期、增加直肠癌手术保肛率，为直肠癌手术创造条件。 2.直肠癌新辅助治疗后VEGF升高；Ki-67有降低趋势，但未显示出统计学意义。 3.VEGF的表达与肿瘤侵润深度及有无淋巴结转移有关，与性别、年龄、肿瘤大小及组织学类型无关；Ki-67的表达与有无淋巴结转移有关，与性别、年龄、肿瘤大小及组织学类型无关。 4.VEGF、Ki-67的表达均与放化疗的敏感程度有关，均表达出低表达者对放化疗敏感性好，高表达者对放化疗敏感性差。

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研究生导师和课题指导小组成员

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结果

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结论

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参考文献

综述 直肠癌新辅助治疗的研究进展

攻读学位期间取得的研究成果（含发表的学术论文）

致谢