CSAG1基因在乳腺癌及分子分型中的差异表达研究及临床意义

摘要

乳腺癌来源于乳腺上皮组织，为女性常见的一种恶性肿瘤，近年来我国乳腺癌发病率逐年上升并朝低龄化趋势发展，已成为当今社会的重大公共卫生问题。虽然随着医学的发展，早期诊断和治疗降低了乳腺癌患者的死亡率，但就目前而言，乳腺癌仍是恶性肿瘤中死亡率较高的疾病。乳腺癌属于高度异质性疾病，即使在病理类型、组织学分级、临床分期及治疗均相同的情况下，患者的生存预后也存在极大差别。Perou和Sorlie等人将乳腺癌根据分子分型，分为Basal-like、Luminal A、Luminal B、HER2过表达、Normal等五型，不同分型的乳腺癌患者其治疗及预后差异明显。因此，详细的分子分型能有效的反映乳腺癌的生物学特征，并指导临床选择治疗方案及判断预后。软骨肉瘤相关基因1（Chondrosarcoma associated gene1，CSAG1），定位于人染色体Xq28，研究表明CSAG1在正常睾丸组织中表达，同时也有报道显示CSAG1是在黑色素瘤细胞株、白血病K562细胞以及恶性神经鞘瘤组织中高表达的基因，研究表明CSAG1与肿瘤发生、发展有着密切的联系，但有关乳腺癌中CSAG1基因的表达情况和预后价值的相关研究还未见报道。
　　目的：
　　探索CSAG1在不同乳腺癌分子分型中的表达及作用，为临床乳腺癌治疗和预后判断提供必要的理论依据。
　　方法：
　　1.通过免疫组织化学方法对100例乳腺癌福尔马林固定石蜡包埋（Formalin Fixed and Paraffin Embedded，FFPE）组织样本结合ER、PR、HER2、Ki-67的表达情况进行分子分型。
　　2.采用RT-PCR方法检测CSAG1基因在不同分子分型的乳腺癌临床患者FFPE组织样本及乳腺癌细胞系中mRNA表达水平。
　　3.通过免疫组织化学方法检测CSAG1蛋白在不同分子分型的乳腺癌临床患者FFPE组织样本中表达水平。
　　4.利用卡方检验及Spearman等级相关分析CSAG1与临床病理参数及乳腺癌经典标志物之间的相对表达水平及相关性。
　　5.运用GraphPad Prism5统计软件及cbioportal生物信息学分析软件进行生存分析。
　　结果：
　　1.根据2011年St.Gallen共识，并结合术后病理免疫组织化学染色ER、PR、HER2、Ki-67表达情况将100例乳腺癌进行分子分型，分别筛选出Luminal A亚型18例，Luminal B亚型29例，HER2过表达亚型4例，Basal-like亚型35例，Normal（non-Basal-like）亚型14例。
　　2.乳腺癌分子分型与临床病理参数的关系分析结果显示：在Luminal A亚型乳腺癌中组织学分级I-II级所占比例最高，组间具有统计学差异（P＜0.0001）。
　　3.在临床乳腺癌患者FFPE组织样本中RT-PCR结果显示：CSAG1基因在乳腺癌分子分型Luminal A亚型中的表达量高于其他乳腺癌分子亚型，组间差异具有统计学意义（P<0.05）。
　　4.在不同乳腺癌细胞系中RT-PCR结果显示：CSAG1基因在T47D（Luminal A型乳腺癌，ER和/或PR+，HER2-，Ki-67<14％）中较其他乳腺癌细胞系（ZR75.1、HDQ-P1、CAL-120、CAL-51、MDA-MB-436、MDA-MB-231）及正常乳腺上皮细胞系（HBL-100）显著高表达，差异具有统计学意义（P<0.0001）。
　　5.在临床乳腺癌患者FFPE组织样本中免疫组化结果显示：CSAG1蛋白表达阳性率在乳腺癌分子分型Luminal A亚型中高于其他乳腺癌分子亚型，组间差异具有统计学意义（P<0.05）。
　　6.CSAG1蛋白表达与临床病理参数之间的关系分析结果显示：CSAG1蛋白表达在组织学分级的I-II级中较III级中相对表达水平高，差异具有统计学意义（P<0.05）；在临床病理组织学类型、TNM分期、年龄、肿瘤直径、淋巴结转移分组中相对表达水平均无明显差别。
　　7.CSAG1与临床病理参数相关性分析利用Spearman等级相关结果显示：CSAG1蛋白表达与临床病理组织学分级呈负相关，差异具有统计学意义（P<0.05）；而与年龄、肿瘤直径、淋巴结转移、临床病理组织学类型及TNM分期均无相关性。
　　8.CSAG1蛋白表达与乳腺癌经典标志物之间的关系分析结果显示：CSAG1蛋白表达在ER及Ki-67阳性组中较ER及Ki-67阴性组中相对表达水平稍高，在HER2阴性组中较HER2阳性组中相对表达水平高，而在PR阳性与阴性组中表达水平无明显差别。
　　9.CSAG1与乳腺癌经典标志物相关性分析利用Spearman等级相关结果显示：CSAG1蛋白表达与ER、PR表达呈正相关（r=0.237、0.173），与Ki-67增殖指数呈负相关（r=-0.251），差异均具有统计学意义（P<0.05）；而与HER2蛋白表达无相关性。
　　10.与临床乳腺癌患者生存相关性分析结果显示：CSAG1蛋白表达阳性的乳腺癌患者较CSAG1蛋白表达阴性的乳腺癌患者后期的生存稍好，但差异无统计学意义。
　　结论：
　　1.CSAG1在乳腺癌分子分型Luminal A亚型中高表达，提示CSAG1高表达在乳腺癌中筛选出Luminal A亚型有一定作用。
　　2.高表达CSAG1的乳腺癌患者其临床病理组织学分级低、生存期稍高，预后相对较好。
　　3.CSAG1表达与ER、PR表达呈正相关，可作为辅助临床乳腺癌患者行内分泌治疗及预后判断的指标之一。
　　4.CSAG1表达与Ki-67增殖指数呈负相关，可辅助Ki-67进行分子分型并指导临床进行预后分析。

目录

声明

英文缩略词表

第一章 前言

1.1乳腺癌概况

1.2乳腺癌分子分型

1.3 CSAG1

1.4立题依据

第二章 CSAG1在不同分子分型乳腺癌中的表达情况

2.1实验材料

2.2 实验方法

2.3实验结果

2.4小结

第三章CSAG1与临床病理学指标的相关性分析研究

3.1实验材料与方法

3.2实验结果

3.3小结

第四章 讨论

第五章 全文结论

参考文献

综述：三阴乳腺癌临床病理特征及其分子标志物相关性

论著：GABRP基因在基底样三阴乳腺癌中的差异表达研究

个人简历

致谢