刺参弧菌病病原菌分离、鉴定及防治研究

摘要

分离鉴定了青岛地区三个养殖场发病刺参携带的18株细菌，经PcR筛选、生理生化鉴定，其中A-1、A-2、A-4为美人鱼弧菌，A-10、A-11、A-12为海蛹弧菌，A-9为副溶血弧菌，A-3、A-5、A-6为杀鲑气单胞菌史氏亚种，A-7、A-8为松鼠葡萄球菌，A-13、A-17、A-18为海单胞菌，A-14、A-15、A-16为交替单胞菌。 将18株分离菌进行回归试验，三株美人鱼弧菌可以引起刺参发病。比较了浸染、创伤感染、注射三种方式，证明创伤感染是引起刺参发病的主要途径；注射方式致死刺参速度最快，创伤方式次之，浸染方式最慢。18株细菌混合后可以引起刺参死亡率增加，可能细菌之间有协同作用。病原菌在溶氧5.0mg/L的条件下对刺参的致死率比8.0mg/L条件下明显上升，说明溶氧对刺参发病有很大影响。三株病原菌适宜生长条件为盐度10‰-50‰，pH5-10，16℃-28℃。 药敏试验显示环丙沙星，依诺沙星，恩诺沙星，红霉素，壮观霉素，左氧氟沙星，链霉素对三株美人鱼弧菌都有较强抑制作用，进一步测定了敏感药物的MIC、MBC。大蒜汁对两株美人鱼弧菌A-1，A-4有较强杀灭作用，但是对A-2株没有抑制效果。成功筛选到1株乳酸菌，命名为B-1株，生理生化鉴定为嗜酸乳杆菌。其胞外产物对美人鱼弧菌具有较好的抑制作用，并且进一步探讨了胞外产物的抑菌特性，该菌株的抑菌成分对热不敏感，蛋白酶K对其活性有较大影响。成分可能是细菌素。研究了B-1株产生的细菌素量和生长曲线的关系；比较了吐温80、聚乙二醇6000、吐温20三种刺激因子对B-1株产细菌素的影响，证明吐温80效果最好，并确定了最佳加入量为0.15％。确定了B-1株37℃培养温度细菌素产量最大。

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声明

1绪论

1.1研究的目的和意义

1.2弧菌和弧菌病的研究现状

1.2.1弧菌和弧菌病概述

1.2.2弧菌的致病机理

1.3弧菌病的防治方法

1.3.1鱼类弧菌病疫苗免疫

1.3.2免疫增强剂

1.3.3药物治疗

1.3.4生物防治

1.3.5乳酸菌的抑菌研究

2病原菌的分离鉴定

2.1材料与方法

2.1.1试验材料

2.1.2试验方法

2.2结果

2.2.1刺参携带菌的分离纯化

2.2.2刺参携带菌的鉴定

2.2.3分离菌回归试验

2.2.4病原菌的生长特性初步研究

2.3讨论

3防治方法的研究

3.1材料和方法

3.1.1试验材料

3.1.2试验方法

3.2结果

3.2.1敏感药物效果

3.2.2大蒜对病原菌的抑制作用

3.2.3乳酸菌的抑制效果

3.3讨论

参考文献

全文总结

致谢