桃叶有效成份提取工艺及化学组分分析

摘要

桃叶为蔷薇科植物桃的叶子，在我国分布十分广泛。桃叶含有多种具有生理活性的有效成分，这些有效成分在食品、医药等行业有着广泛的用途。本文以从桃叶中获得品质优良的有效成分产品为目标，对桃叶中奎宁酸的提取、纯化工艺和检测方法进行了深入的研究，并对桃叶中黄酮类化合物进行了初步的结构鉴定，同时研究了桃叶有效成分的综合提取工艺和抗氧化活性。本研究为进一步开发利用桃叶资源提供了理论依据和技术依据，具有一定的应用价值。
　　 1、以桃叶为原料，采用溶剂法、超声波辅助提取法和纤维素酶法提取桃叶奎宁酸，通过实验比较，确定溶剂提取法最适合产业化推广，其最佳工艺为：以水做提取溶剂、温度62℃、时间4h、液固比40:1(mL:g)，奎宁酸得率达到5.28％。
　　 2、确立了薄层层析法定性分析桃叶中奎宁酸的方法，分析条件为：吸附剂，薄层层析硅胶；展开剂，乙酸乙酯：甲酸：水(7：2.5：2.5)，上层溶液；检出，置紫外灯(365nm)下观察。奎宁酸在紫外灯的照射下显蓝色荧光。
　　 3、采用大孔吸附树脂对奎宁酸提取液进行纯化处理，确定了最佳纯化工艺：将提取液经微膜过滤后，将滤液浓缩，配制成奎宁酸浓度为0.33mg/mL的上柱液，采用HPD400大孔吸附树脂，上柱量5BV，吸附流速1.5mL/min，解吸剂10％乙醇，解吸流速1mL/min，采用此方法，可以得到纯度为45.1％的奎宁酸纯化物。
　　 4、采用有机溶剂提取法和纤维素酶法两种方法提取桃叶中总黄酮，通过实验比较，确定有机溶剂提取法最适合产业化推广，其最佳工艺为：提取温度60℃、乙醇浓度67％、提取时间4h、液固比22:1(mL:g)，此条件下黄酮得率为3.63％。
　　 5、将桃叶黄酮提取液经液液萃取、AB-8大孔吸附树脂、聚酰胺及Sephadex-LH20柱反复纯化后得四种物质，经薄层色谱、紫外扫描和红外色谱综合分析可以初步判定：化合物Ⅰ为黄酮苷，其母核A环上无7-OH，无邻二酚羟基；B环上有3′-OH和4′-OH;化合物Ⅱ不是黄酮类化合物，其结构中含有苯环，羟基和C-H键；化合物Ⅲ为黄酮，其母核A环上无7-OH，无邻二酚羟基；B环上有4′-OH，无3′-OH;化合物Ⅳ为柚皮素。
　　 6、通过对桃叶有效成分的综合提取工艺研究发现最佳综合提取工艺为先用石油醚提番茄红素，再用水提奎宁酸，最后用甲乙醇混合溶剂提柚皮素。
　　 7、研究了桃叶中各有效成分（番茄红素、柚皮素和奎宁酸）的抗氧化活性。研究表明：番茄红素、柚皮素和奎宁酸均可有效清除超氧阴离子、羟基自由基和DPPH自由基；桃叶中各有效成分抗氧化能力大小均依次为：番茄红素＞柚皮素＞奎宁酸。