SS基因多态性与13/17罗伯逊易位猪早期生长的关联分析

摘要

本试验以13/17罗伯逊易位杂合子猪的三种杂交组合（13/17易位杂合子猪×13/17易位杂合子猪，约克×13/17易位杂合子猪，皮杜×13/17易位杂合子猪）的309头杂交后代为研究对象，以生长激素抑制素基因（Somatostatin，SS）作为控制猪早期生长主基因的候选基因，利用PCR-SSCP技术对13/17罗伯逊易位猪三个杂交组合的后代生长激素抑制素基因的外显子1及内含子进行单棱苷酸多态性检测，同时结合各杂交后代的早期生长性状记录和核型，研究核型与SS基因不同基因型对早期生长性状的遗传效应。
　　 结果如下:
　　 1、采用外周血淋巴细胞培养制备染色体标本，对13/17罗伯逊易位杂合子猪三种杂交组合后代进行核型鉴定，结果显示:13/17罗伯逊易位杂合子猪×13/17易位杂合子猪杂交后代存在三种不同核型的猪:正常核型猪（2n=38）、易位杂合型猪(2n=37)及易位纯合子猪（2n=36）;约克×13/17易位杂合子猪与皮杜×13/17易位杂合子猪的两种杂交组合的后代中存在正常核型和易位杂合型两种.
　　 2、生长激素抑制素基因外显子1不存在多态性;其内含子的266-602bp片段存在两个突变位点(T520C，G521T)，但仅检测到两种基因型:AA和AB.遗传多态性分析结果表明:不同杂交组合后代及不同核型的猪群中AA基因型频率（频率范围为0.58-0.77）和A等位基因频率（频率范围分别为0.79-0.90）均高于其AB基因型频率(0.23-0.42)和B等位基因频率(0.1-0.21);易位杂合子猪的AB基因型频率(0.42)均高于正常猪(0.25)及易位纯合子猪(0.40).经x2检验，差异不显著(P＞0.05)，在群体中基因型频率分布处于哈代-温伯格平衡状态.
　　 3、三种杂交组合后代中，相同核型不同基因型的猪之间，各时期的体重差异均不显著(P＞0.05)，但AB基因型猪的各阶段体重均略高于AA;13/17易位杂合子猪×13/17易位杂合子猪杂交后代中的正常核型猪与皮杜×13/17易位杂合子猪杂交后代中的易位杂合子猪的20-40日龄平均日增重AA＜AB(P＜0.05)。不同核型相同基因型的杂交后代中，13/17易位杂合子猪×13/17易位杂合子猪杂交后代AB基因型猪的40及55日龄重与约克×13/17易位杂合子猪杂交后代中AA及AB两基因型猪的20、40及55日龄重，均为易位杂合子猪大于正常猪(P＜0.05)。

目录

摘要

符号和缩略词说明

引言

第一章 文献综述

1．罗伯逊易位的研究进展

1．1 罗伯逊易位的现状和内容

1．2 罗伯逊易位研究的技术方法

1．3 罗伯逊易位对携带者的影响

1．4 罗伯逊易位的应用

2 SS基因研究进展

2．1 SS在动物体内的分布

2．2 SS基因的表达

2．3 SS的生物学功能

2．4 SS的分子生物学研究现状

3 单核苷酸多态性的研究进展

3．1 单核苷酸多态性

3．2 基因组SNPs的发现及定位

3．3 SNPs的检测方法

3．4 SNPs的应用前景

第二章 三种杂交后代猪的核型鉴定

1．试验材料

1．1 主要试剂

1．2 主要仪器设备

2 试验方法

2．1 综合培养基的分装

2．2 采血

2．3 淋巴细胞培养

2．4 秋水仙素处理

2．5 标本片制作与观察

2．6 染色体核型鉴定

3 试验结果与分析

4 讨论

第三章 三种杂交组合后代生长激素抑制素基因单核苷酸多态性的检测

1 试验材料

1．1 主要试剂

1．2 试剂的配制

1．3 主要仪器

2 试验方法

2．1 仔猪早期生长记录

2．2 统计软件

2．3 基因组DNA的提取殁质量检测

2．4 引物的设计与合成

2．5 PCR反应体系及反应条件

2．6 电泳

2．7 PCR产物的回收

2．8 PCR产物的克隆

3 结果与分析

3．1 PCR扩增结果

3．2 SSCP检测结果

3．3 猪SS基因不同基因型在三种杂交组合后代猪群中的分布

3．4 猪SS基因AA和AB基因型的序列比较

3．5 猪SS基因不同基因型与三种杂交组合后代初生重和早期生长的关联分析

4 讨论

4．1 猪SS基因单核苷酸多态性的检测

4．2 猪SS基因不同基因型与三种杂交组合后代的生产性状间的关系

结论

参考文献

致谢

攻读硕士期间发表的论文

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