抗LPS Fab、BPI和Fab-BPI融合蛋白真核表达载体的构建及其在CHO细胞中的表达

摘要

近年来,免疫疗法已成为清除循环血中LPS的重要手段之一.抗LPS单克隆抗体（mAb）自20世纪80年代以来获得了深入研究,针对高度保守的LPS核心糖脂和类脂A的mAbs曾一度被认为可以中和各种GNB的LPSs.但是,许多mAbs,包括令人充满希望的E5和HA-1A mAbs,由于缺乏广泛交叉反应性,均以临床试验失败而告终.本实验室以LPS的体内共同代谢产物LPS-HDL复合物研制出了具有广泛交叉反应性的mAbs,实验证实其对LPS攻击的小鼠有良好的保护作用,目前正在进一步验证其抗LPS效果.另一方面,新近发现的一种存在于中性粒细胞颗粒中的阳离子蛋白-杀菌/通透性增强蛋白（BPI）,具有强大的抗菌和中和LPS功能.重组BPI N端蛋白抗LPS的研究已取得了重大进展,但阻碍其临床应用的缺点也是显而易见的,即与LPS交叉反应性局限、可被LBP竞争抑制及半衰期极短.为此,该课题在分别完成BPI和抗LPS mAb Fab的CHO表达基础上,进一步构建和表达了Fab-BPI融合蛋白,以期充分发挥其抗LPS的优越性.

目录

缩略词表

前 言

文献回顾

LPS致病机制的研究进展

抗LPS的研究和BPI

研究内容

第一部分BPI N端cDNA的克隆与表达

第二部分抗LPS Fab片段真核表达载体的构建及其在CHO细胞中的表达

第三部分Fab-BPI融合蛋白真核表达载体的构建及其在CHO细胞中的表达

小 结

参考文献

致谢

博士在读期间发表的论文