猕猴皮肤成纤维细胞与家兔去核卵母细胞构建异质重构胚的初步研究

摘要

该研究旨在探讨猕猴皮肤成纤维细胞与家兔去核卵母细胞构建异质重构胚的可能性及其体外发育的潜能.在实验中,建立起了猕猴皮肤成纤维细胞系,并观察了细胞的生物学特性;采用超数排卵和重复手术方法,收集和筛选出了足量、高质的家兔成熟卵母细胞;以猕猴皮肤成纤维细胞核为供体、以家兔去核卵母细胞为受体进行异种体细胞核移植的初步尝试,获得了二者异质重构胚,并探讨了各种因素对重构胚体外发育能力的影响.结论:获得了体外发育至囊胚的猕猴-家兔异种核移植重构胚,表明家兔去核卵母细胞质支持猕猴成纤维细胞进行发育程序重编,形成的核移植重构胚在体外具有发育潜能性.同期证实,供体细胞同步化处理、受体细胞来源、融合激活方法、体外培养体系等因素对异种核移植重构胚体外发育能力均有影响.

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摘要

Abstract

前言

第一部分 文献回顾 哺乳动物异种核移植研究进展

一、哺乳动物核移植研究简史

二、哺乳动物异种核移植研究进展

三、哺乳动物核移植的基本程序

㈡受体细胞的准备

㈢核移植操作及重构胚的激活

㈣核移植重构胚的体外培养

四、影响核移植重构胚发育的主要因素

㈠受体细胞的选择与MPF的作用

㈡核质互作与细胞核的重新编程

㈢供体细胞与受体细胞周期同步化

五、异种动物核移植研究存在的问题

六、异种动物核移植研究的前景展望

第二部分实验研究

一、猕猴皮肤成纤维细胞体外培养及生物学特性

1材料与方法

2结果

3讨论

4小结

二、重复手术法收集超数排卵后的兔卵母细胞

1材料与方法

2结果

3讨论

4小结

三、猕猴皮肤成纤维细胞与兔去核卵母细胞种间核移植构建重构胚

1材料与方法

2结果

3讨论

4小结

参考文献

致谢