小鼠p27 kip1真核表达载体的构建及其对单个核细胞周期的影响

摘要

目的：构建小鼠p27kip1真核表达载体，探讨其对单个核细胞生长情况和细胞周期的影响，为进一步研究p27kip1在疾病防治中的作用奠定基础。
　　方法：将小鼠p27kip1基因克隆至pcDNA3.0真核表达载体上，并经脂质体介导转染至小鼠单个核细胞中，应用MTT法和流式细胞仪分析转染细胞生长情况和细胞周期。
　　结果：经酶切分析和测序鉴定，成功构建了小鼠pcDNA3.0/p27kip1重组质粒；经pcDNA3.0/p27kip1转染的单个核细胞中p27蛋白表达增多，其生长增殖不仅受到明显抑制，而且处于G1/G0期的细胞显著增加，处于S期的细胞显著减少。
　　结论：构建的pcDNA3.0/p27kip1真核表达载体能够在单个核细胞中表达，且高表达的pcDNA3.0/p27kip1可以通过阻抑细胞周期的途径抑制单个核细胞的生长。

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文献回顾

1. 周期素与周期素依赖性激酶

2. CDK抑制蛋白

3. p27Kip1

小鼠p27 kip1真核表达载体的构建及其对单个核细胞周期的影响

一 材料

二 方法

三 结果

四 讨论

小结

参考文献

致谢