黄山毛峰和祁门红茶中多酚类成分分析及其抗肝损伤作用研究

摘要

茶叶中含有大量丰富的茶多酚,可以通过清除机体在新陈代谢过程中产生内源性和由食品、药品、环境污染等外界因素下引入的自由基,具有抗氧化和抑制机体脂质过氧化反应发生等生理功能,被认为是自然界中存在的一类天然抗氧化剂。茶叶因品种、生长气候环境、日照、制作工艺等因素影响,因此含有的茶多酚种类及含量不尽相同,使各种茶叶之间抗氧化活性及药理作用存在明显差异。
　　针对黄山毛峰和祁门红茶中茶多酚物质组成不清楚,抗肝损伤效果不明确等问题,本研究在黄山毛峰和祁门红茶多酚的提取制备基础上,建立了其HPLC分离分析方法,表征了黄山毛峰和祁门红茶中的茶多酚的组成与含量;并把体外和体内研究有机结合,探讨黄山毛峰和祁门红茶多酚的抗氧化损伤作用,系统阐释其抗肝损伤的药效作用,为黄山毛峰和祁门红茶多酚的进一步开发利用提供了理论与实验依据。
　　采用有机溶剂提取法从黄山毛峰和祁门红茶中提取茶多酚,并分别对其进行分离及含量测定。建立了黄山毛峰茶多酚(HMTP)中8种单体(Caffeine、Chlorogenic acid、EC、Caffeic acid、EGC、EGCG、 Rutin、Hyperoside、ECG、Quercetin)的分离分析方法,并测出各单体含量,发现黄山毛峰的主要组成多酚为:表没食子儿茶素(EGC,271.2μg/mg)、芦丁(rutin,239.3μg/mg)、表儿茶素(EC,89.3μg/mg)。建立了祁门红茶多酚(KBTP)中6种单体(Caffeine、EC、Caffeic acid、EGC、Rutin、Quercetin)的分离分析方法,并测出各单体含量,发现祁门红茶中主要茶多酚为:表儿茶素(439.82μg/mg)、芦丁(125.65μg/mg)表没食子儿茶素(66.81μg/mg)。
　　体外抗氧化活性研究结果表明:与同浓度的阳性药物(BHT)相比,HMTP和KBTP均具有较强的自由基(DPPH-、O2-、OH-)清除能力及对Fe3+的还原能力,并且呈良好的量效关系。
　　将HMTP和KBTP分别按照200,400,800 mg/kg的剂量应用到CCl4诱导的小鼠急性肝损伤保护实验中,与模型组(BP400mg/kg)相比较,预先给予小鼠低中高三种不同剂量的HMTP和KBTP均能显著降低小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)活性和肝组织中丙二醛(MDA)含量,提高谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化岐化酶(SOD)水平(p<0.05),且呈剂量依赖关系。同时,肝组织病理切片显示:提前给予不同剂量 HMTP/KBTP的小鼠,肝脏均受到一定程度的保护。且当给予高剂量HMTP或KBTP时,肝细胞突变数目较少,形态较完好,结构同正常组无明显区别。上述结果表明:HMTP和KBTP均对CCl4诱导的小鼠急性肝损伤具有较好的保护作用。
　　综上所述,本研究采用HPLC法,建立10种多酚的分离分析方法,明确了HMTP和KBTP的物质组成基础;采用DPPH-、O2-、OH-清除能力及对Fe3+的还原能力实验,表明HMTP和KBTP具有较强的体外抗氧化活性;在此研究基础上,采用小鼠肝损伤模型,系统的研究了这两种茶叶中所含茶多酚对小鼠肝脏的保护作用机制并进行了肝组织病理切片分析,且对其茶多酚的剂量与肝保护效应之间的关系进行了较详尽的比较分析,为黄山毛峰和祁门红茶的抗氧化损伤研究奠定基础。

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前言

文献回顾

实验一 黄山毛峰和祁门红茶多酚的提取工艺研究及组成分析

1 材料与设备

2 实验方法

3 结果

4 讨论

实验二 黄山毛峰中茶多酚提取物对小鼠肝损伤的保护作用研究

1 材料与设备

2 实验方法

3 结果

4 讨论

实验三 祁门红茶多酚提取物对小鼠肝损伤的保护作用研究

1 材料与设备

2 实验方法

3 结果

4 讨论

小结

参考文献

个人简历和研究成果

致谢