多肽及γ链细胞因子对慢性HBV感染者CD8+T细胞上Tim-3的表达影响

摘要

乙型病毒性肝炎(viral hepatitis B)，简称乙肝，是由乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)感染人体引起的传染性疾病。据统计，在世界范围内慢性HBV感染者约有3.5亿人，而每年由病毒性肝炎引起的相关疾病死亡人数近60万人。慢性乙型病毒性肝炎(chronic hepatitis B，CHB)流行病学最新调查表明，我国HBV携带率为7.18％。
　　慢性乙型病毒性肝炎的发病机制尚未研究明确，但研究发现乙型肝炎病毒感染的慢性化主要是病毒诱导机体对其感染形成的一种持续的免疫耐受状态，特别是与细胞毒性T淋巴细胞（Cytotoxic T cell,CTL）低反应状态和功能耗竭有关。在慢性乙型病毒性肝炎感染过程中，γ链（Gamma-Chain,γC）细胞因子和免疫负性调节分子 T淋巴细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(T-cell immunoglobulin domain and mucin domain-containing molecule-3，Tim-3)都参与了对CD8+T淋巴细胞的免疫调节，继而影响机体杀伤病毒和清除病毒的能力。本研究通过给予慢性乙型病毒性肝炎患者外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cells，PBMC)γC细胞因子和抗原等诱导刺激，检测CD8+T淋巴细胞上Tim-3的表达情况，探讨它们与Tim-3高表达之间的相关性，为进一步明确慢性乙型病毒型肝炎的发病机制，寻找更佳的免疫治疗方法奠定基础。
　　目的：给予抗原和γC细胞因子等刺激，检测慢性乙型肝炎病毒感染者 PBMC中CD8+T细胞上Tim-3的表达情况，研究它们对Tim-3的表达影响作用。
　　方法：1.收集56例无症状HBV携带者，114例初治的慢性乙型肝炎患者和50例健康人的外周血，同时收集相关的谷丙转氨酶（alanine aminotransferase，ALT）、HBV DNA定量等临床资料；2.采用淋巴细胞分离技术获取慢性乙型肝炎患者和健康人的PBMC，并冻存；3.将PBMC按分组单独或联合给予抗原、多肽、γC细胞因子、γC细胞因子中和抗体等刺激；采用流式细胞术检测CD8+T细胞上Tim-3的表达情况。4.分析多肽和γC细胞因子等因素对CD8+T细胞上Tim-3的表达影响。
　　结果：1.HBV多肽、γC细胞因子单独、两者联合和协同抗人CD3/CD28单克隆抗体（Anti-Human CD3/CD28 Functional Monoclonal Antibody，Anti-CD3/CD28）刺激，都能显著增强Tim-3在慢性乙型肝炎病毒感染者CD8+T淋巴细胞上的表达，差异有统计学意义。2.ALT水平与Tim-3的表达存在正相关。3.γC细胞因子中和抗体能诱导Tim-3的表达降低，但差异无统计学意义。
　　结论：上述研究表明，慢性乙型肝炎病毒感染者外周血中CD8+T细胞上Tim-3的高表达不仅能被HBV抗原、多肽和γC细胞因子单独诱导，而且两者联合刺激也能增强其表达，进一步明确了慢性乙型病毒性肝炎的发病机制。

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缩略语表

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前言

文献回顾

1 HBV感染的研究现状

2 Tim-3的研究现状

3γC细胞因子的研究现状

第一部分 HBV抗原及多肽对慢性HBV感染者CD8+T上Tim-3的表达影响

1 材料

2 方法

3 结果

4 讨论

第二部分 γC细胞因子对慢性HBV感染者CD8+T细胞上Tim-3的表达影响

1 材料

2 方法

3 结果

4 讨论

第三部分 HBV 多肽与γC细胞因子联合，对慢性HBV感染者CD8+T细胞上Tim-3的表达影响

1 材料

2 方法

3 结果

4 讨论

小结

参考文献

个人简历和研究成果

致谢