表皮生长因子及其受体在胎儿生长受限时的表达及川芎嗪的作用

摘要

目的：研究胎儿生长受限(FGR)时表皮生长因子(EGF)及其受体(EGFR)的表达变化，并探讨川芎嗪注射液对FGR的干预作用。 材料与方法：成年无交配史Waister雌鼠24只，体重220-300g，山西医科大学实验动物中心提供，所用香烟为市售香烟，烟碱含量1.1mg/只，焦油含量15mg；酒为市售白酒，酒精度45％。川芎嗪注射液由北京永康药业有限公司提供。雌雄按1：1随机于前一晚合笼，次日晨，取雌鼠阴道分泌物涂片镜检，检出精子者确定为妊娠0日。按妊娠先后顺序随机分为三组：正常组、FGR模型组、川芎嗪注射液治疗组。为了清除同窝胎数对胎鼠体重的影响，分娩胎数少于6只或大于14只的孕鼠予以剔除。室温20℃，安静环境下分笼饲养。模型组、治疗组自妊娠7日起，每日置于烟气环境中3次，每次15min，燃烟1支；每日白酒9ml(kg．d)灌胃。正常组同时间置于密闭环境中，并予等量生理盐水灌胃。治疗组自妊娠13日起每日腹腔注射川芎嗪注射液8mg(kg．d)，连用7日。正常及模型组同期腹腔注射等量生理盐水。于孕20日行剖宫术，术前取孕鼠母血清5ml，术中取脐静脉血5ml，离心分离血清，均取上清液-20℃保存备检。EGF测定采用放射免疫分析法，试剂由天津九鼎生物工程工司提供。于孕20日行剖宫取胎术，逐一取出胎鼠，擦净羊水并称重。记录鼻臀长度时，将胎鼠置于直尺上，使其鼻尖、顶部、尾跟部均位于一直线，其鼻尖到尾根部的距离为鼻臀长度。胎仔重量系数(poundera．index，PI)=胎仔重量(g)．100/胎仔身长(cm)。分别取胎盘、胎膜10％福尔马林固定24小时，随后脱水、包埋制作蜡块片，待检。采用免疫组化法，兔抗鼠EGF及EGFR多克隆抗体、SABC试剂盒由武汉博士得供应。结果判定：细胞膜、细胞浆呈棕黄着色为阳性反应；细胞无棕黄着色为阴性反应。以BZ-2000医学图像分析系统多组织切片进行图像分析。同一组织在高倍镜下分别取10个不同视野行平均灰度测定。 结果: 1．川芎嗪对烟酒所致胎仔生长受限的影响各组胎鼠数、体重、鼻臀长度、体重系数生长参数的比较：模型组与正常组比较，*p<0.05：川芎嗪注射组与模型组比较， **p<0.05． 2.3组母血、脐血中EGF浓度的比较模型组母血脐、血中EGF浓度与正常组比较差异有显著性(P<0.05)。川芎嗪注射液组与正常组母血中EGF浓度比较差异无显著性(p>0.2)． 3.EGF在胎盘和胎膜的表达光镜下胎盘和胎膜均见免疫反应阳性。免疫阳性物质大多位于胞浆及胞膜。胎盘阳性细胞主要位于基底层及迷路区滋养细胞，毛细血管内皮也有表达。模型组表达的灰度及面积大正常组(p<0.05)。川芎嗪注射组与模型组比较差异明显(p<0.05)。 4． EGFR在胎盘和胎膜的表达EGFR在模型组胎盘的表达强于正常组(p<0.05)。川芎嗪注射液组与模型组比较，川芎嗪治疗效果明显(p<0.05)。 结论: 1．烟酒造模是研究FGR的理想方法。 2．EGF水平及其受体与FGR发病有关，川芎嗪注射液可能直接或间接促进EGF的合成和分泌，促进胎儿宫内发育。 3．FGR的胎盘病理改变是造成FGR胎盘功能减退的形态学基础。EGFR在胎儿胎盘的生长发育过程中及FGR的病理过程中起重要作用。 4．川芎嗪可以改善子宫胎盘血流量，防止某些致病因素对EGF及受体基因表达的阻断，促进胎儿宫内发育。

目录

文摘

英文文摘

声明

前言

第一部分表皮生长因子及其受体在胎儿生长受限时的表达及川芎嗪的作用

第二部分FGR大鼠胎盘病理改变川芎嗪干预的相关性研究

讨 论

全文总结

结 论

参考文献

附 图

综述:表皮生长因子FGR关系的研究进展

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致 谢