幽门螺杆菌感染与胃黏膜上皮细胞TGF-β1及B7-H1表达的研究

摘要

目的:探讨不同菌量幽门螺杆菌(H． pylori)对体外感染胃黏膜上皮细胞转化生长因子β1(TGF—β1)、B7—H1 mRNA表达的影响及其诱导TGF—β1表达的菌体因素，为支持H．pylori通过诱导胃黏膜上皮细胞表达TGF—β1及B7—H1，抑制宿主免疫功能，参与H． pylori免疫逃逸提供依据。 方法:①选用1.0×109CFU/ml(低浓度)，4.0×109CFU/ml(中浓度)，8.0×109CFU/ml(高浓度)H． pylori国际标准毒力菌株NCTC11637活菌悬液分别感染体外培养胃黏膜上皮细胞，建立不同共孵育时间(0h、0.5h、1h、1.5h、2h、4h、8h、12h)H． pylori体外感染细胞模型，设立未加H． pylori的胃黏膜上皮细胞对照组，以酶链免疫吸附法(ELISA)检测感染及对照细胞各时间点培养上清TGF—β1含量，原位杂交法检测不同浓度感染及对照细胞共培养12 h B7—H1 mRNA的表达；②同时用H．pylori中浓度灭活菌悬液与体外培养胃黏膜细胞共孵育，测定共孵育细胞2h、12h培养细胞上清的TGF—β1含量。③用超声粉碎并经离心获取的H．pylori菌体成分上清、沉淀以及煮沸后上清、沉淀分别作用体外培养胃黏膜细胞，测定2h、12h培养细胞上清TGF—β1含量。 结果:①H．pylori活菌悬液三种浓度各时间组胃黏膜上皮细胞培养上清TGF—β1含量均较对照组明显增高(P＜0.05)，各浓度时间组TGF—β1表达量有相似的动态趋势，但尤以中浓度组TGF—β1表达量最高(P＜0.05)；②中浓度H． pylori灭活菌株组与同浓度活菌组细胞培养上清TGF—β1含量差异无统计学意义(P＞0.05)；③H．pylori菌体成分上清组较对照组和沉淀组细胞培养上清TGF—β1表达增高(P＜0.05)；上清煮沸组较未煮沸组明显降低(P＜0.05)；沉淀煮沸组与未煮沸组差异无统计学意义(P＞0.05)。④高、中、低浓度组感染细胞12h B7—H1 mRNA的表达均较对照组增高(P＜0.05)，以中浓度组表达最高，并与高、中、低浓度组12 h感染细胞上清TGF—β1含量呈正相关(rs=0.628，P＜0.01)。 结论: H． pylori可直接诱导胃黏膜上皮细胞分泌TGF—β1，其诱导因素为可溶性不耐热菌体成分；H．pylori同样可诱导胃黏膜上皮细胞B7—H1mRNA表达增高，且B7—H1mRNA表达与TGF—β1存在正相关。推测H．pylori通过诱导TGF—β1、B7—H1高表达，抑制宿主免疫反应，参与H． pylori免疫逃逸。

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前 言

第一章 幽门螺杆菌感染与胃黏膜上皮细胞TGF-β1表达的研究

材料与方法

结果

讨论

第二章 幽门螺杆菌感染与胃黏膜上皮细胞B7-H1mRAN表达的研究

材料与方法

结果

讨论

结论

附图

参考文献

综述 幽门螺杆菌致病机制的研究进展

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致 谢