肠必清栓对UC模型大鼠的治疗作用及机制的实验研究

摘要

UC的病因及发病机制尚未完全明确，迄今为止，众多的研究不断揭示的机制认为UC是基因易感人群肠腔内抗原所引发的粘膜非正常免疫应答反应导致的炎症。为此，近年对本病的治疗焦点主要是采取各种方法封闭炎性通路、阻断炎症过程，从而达到治疗的目的。研究证明，若能阻断或抑制过激的免疫反应，或抑制参与的某些细胞因子、炎性介质，均可缓解病情；同时，免疫反应过程中抗炎症细胞因子和促炎症细胞因子间作用相互平衡从而限制炎症，二者的平衡被打破，可促使炎症的发生，故若能增强抗炎性细胞因子的活性亦能缓解UC病情。肠必清栓是本实验室研究筛选两种副作用小而抗菌抗炎疗效确切的药物4-氨基水杨酸(4-ASA)和盐酸小檗碱(BBH)为主料制成的栓剂，本实验用肠必清栓治疗UC模型大鼠，观察肠必清栓治疗UC的效果，并通过检测大鼠肠组织中细胞因子的表达，探讨其治疗UC的作用机制。
　　 实验采用2,4-DNCB免疫加醋酸局部灌肠法建立大鼠UC模型后，将模型大鼠随机分为五组：A模型对照组(8只)、B肠必清栓低剂量组(10只)、C肠必清栓中剂量组(10只)、D肠必清栓高剂量组(10只)、E柳氮磺吡啶药物对照组(10只)另设F正常对照组(6只)。给药期间观察大鼠的一般情况，2周后处死，计算疾病活动指数(DAI)、结肠指数(CI)、结肠组织病理学评分(HPS)，评价肠必清栓对UC模型大鼠肠组织炎症及损伤的治疗效果。结果：模型组大鼠的DAI、HPS明显增高(P＜0.01)，CI明显降低；与模型组比较，给药组各组大鼠的DAI、HPS表达显著降低(P＜0.01)，但与正常组比较仍有差异(P＜0.01)，CI有不同程度的增高，C、D组与模型组差异显著；B组与C、D组的HPS呈剂量依赖关系，差异显著(P＜0.01)，而C、D组与E组疗效相当，差异无显著性意义。结果显示，肠必清栓可显著减轻大鼠肠组织病理损伤促进组织修复，有效治疗实验大鼠UC。
　　 为进一步研究肠必清栓治疗UC的作用机制，我们查阅大量的文献资料后，筛选出在UC发病及转归中起重要作用的细胞因子，包括在免疫调节中发挥重要作用的IL-1、TNF-α、IL-10，机体抗氧化系统的关键酶SOD，参与炎症及炎症因子转录的COX-2、NF-κBp65以及在组织损伤的修复中起重要调节作用的TGF-β1，通过检测肠必清栓治疗后这些细胞因子表达的变化，从细胞因子角度探讨其治疗UC的免疫学机理和抗炎、抗氧化作用机制，为肠必清栓治疗UC提供一定的实验基础和理论依据。细胞因子检测结果：模型组大鼠肠组织中IL-1β、TNF-α表达显著增多而IL-10显著减少，给药治疗可下调IL-1β、TNF-α的表达(P＜0.01)，提高组织中IL-10的表达量(P＜0.01)，肠必清栓低、中、高剂量组间呈剂量依赖关系，高剂量组与SASP组间差异无统计学差异；模型大鼠肠组织SOD仅少量表达，给药治疗可升高模型大鼠SOD的表达(P＜0.01)，肠必清栓中、高剂量组和SASP组与正常组间差异无显著性意义；模型组大鼠肠组织中COX-2、NF-κBp65和TGF-β1的表达明显增高(P＜0.01)；与模型组比较，用肠必清栓治疗后，给药各组大鼠的COX-2、NF-κBp65和TGF-β1表达显著降低，肠必清栓低剂量组与中、高剂量组的COX-2、NF-κBp65和TGF-β1表达差异显著(P＜0.01)，SASP组的COX-2、NF-κBp65评分与肠必清栓低剂量组间差异无显著性意义，而TGF-β1评分与肠必清栓中、高剂量组相当，无统计学差异。细胞因子检测结果显示，肠必清栓可调节免疫、抗氧化、抗炎并促进组织修复，这可能为其治疗UC的作用机制。

目录

文摘

英文文摘

前言

论文说明：缩略词表

声明

第一章肠必清栓对UC模型大鼠治疗效果的实验研究

1.1材料和方法

1.1.1材料

1.1.2方法

1.2结果

1.2.1肠必清栓对UC大鼠DAI的影响

1.2.2肠必清栓对UC大鼠CI、HPS的影响

1.3讨论

1.3.1给药剂量选择

1.3.2模型制作研究

1.3.3疗效评价

结论

第二章肠必清栓治疗UC模型大鼠的作用机制研究

2.1材料和方法

2.1.1材料

2.1.2方法

2.2结果

2.2.1肠必清栓对UC大鼠结肠组织中免疫调节性细胞因子IL-1β、IL-10、TNF-α表达的影响

2.2.2肠必清栓对UC大鼠结肠组织中抗氧化因子SOD表达的影响

2.2.3肠必清栓对UC大鼠结肠组织中炎性介质COX-2、NF-κBp65及TGF-β1表达的影响

2.3讨论

2.3.1肠必清栓调节免疫的作用

2.3.2肠必清栓抗氧化作用

2.3.3肠必清栓抗炎和促进组织修复的作用

结论

全文总结

参考文献

附录附图

综述溃疡性结肠炎模型制作

个人简历

致谢