血管紧张素-(1-7)对THP-1源性泡沫细胞胆固醇外流的影响及机制探讨

摘要

目的：
　　 本实验通过构建THP-1源性泡沫细胞模型，探讨Ang-(1-7)和腺苷酸环化酶的抑制剂MDL对THP-1源性泡沫细胞胆固醇逆转运相关蛋白ABCA1表达和胆固醇含量的影响。进一步阐明Ang-(1-7)抑制动脉粥样硬化形成的机制。
　　 方法：
　　 培养THP-1源性单核细胞，用佛波酯(PMA)(160nmol/L)诱导为巨噬细胞，加入终浓度为50mg/L的ox-LDL建立泡沫细胞模型。实验分为4组，A组：正常泡沫细胞组；B组：腺苷酸环化酶抑制剂MDL组（简称MDL组）；C组：Ang-(1-7)组；D组：MDL+Ang-(1-7)组。处理24h后，ELISA法检测各组细胞cAMP表达水平，实时荧光定量RT-PCR法和Western-blot检测各组细胞ABCAI mRNA相对表达量和蛋白含量，闪烁计数法检测各组细胞胆固醇流出率，高效液相法检测各组细胞胆固醇含量。
　　 结果：
　　 (1)MDL组与泡沫细胞组相比cAMP表达水平、ABCA1 mRNA相对表达含量、ABCA1蛋白含量及胆固醇流出率明显降低(P＜0.05)，细胞内胆固醇含量增高(P＜0.05)；Ang-(1-7)组cAMP表达水平、ABCA1 mRNA相对表达含量、ABCA1蛋白含量明显升高(P＜0.05)，胆固醇流出率增高(P＜0.05)，胆固醇含量显著降低(P＜0.05)；
　　 (2)与Ang-(1-7)组比较，MDL+Ang-(1-7)组cAMP表达水平、ABCA1 mRNA相对表达含量、ABCA1蛋白含量明显降低(P＜0.05)，胆固醇流出率降低(P＜0.05)，胆固醇含量增高(P＜0.05)。
　　 结论：
　　 (1)Ang-(1-7)能促进泡沫细胞ABCA1表达增加，增加胆固醇流出率，减少泡沫细胞胆固醇含量，逆转泡沫细胞的形成。
　　 (2)MDL可以抑制腺苷酸环化酶的活性，减少cAMP的生成，从而部分拮抗Ang-(1-7)的上述作用，但不能完全阻断Ang-(1-7)的作用。