消癌平联合奥曲肽对小鼠肝癌移植瘤生长抑制作用的研究

摘要

目的：
　　 肝细胞癌(HCC)是常见的恶性肿瘤之一，它的发病率和病死率在我国恶性肿瘤中占前位，同时严重威胁到人们的健康和生命。在临床上至今仍缺乏疗效较好、副作用较小的治疗HCC的药物。中药消癌平注射液(XAP)是近年来常用的抗癌药物，大量实验证明它对HCC有很好的治疗效果；奥曲肽(OCT)通过生长抑素受体(SSTR)发挥抗肝癌的作用，近年来的研究证明其抗癌效果较好，但是关于XAP联合OCT治疗HCC的报道很少。所以本实验通过建立H22肝癌移植瘤小鼠模型，探讨不同浓度XAP联合OCT对HCC的体内抑瘤效果及其可能的作用机制。
　　 方法：
　　 建立小鼠皮下移植癌模型后将实验动物随机分为正常组，模型组，XAP低、中、高剂量组(10g/kg·d，20g/kg·d,40g/kg·d),OCT组(100μg/kg)，XAP低、中、高剂量分别联合OCT组。每组10只，并开始每天腹腔注射给药，每2天测一次移植瘤的长径和宽径，计算各瘤体体积后绘制肿瘤生长曲线。用药2周后24小时，摘眼球放血法处死所有动物，剥离瘤体及脾组织，计算小鼠的肿瘤抑制率和脾指数；依金氏公式q值评价联合用药增效情况；通过HE染色观察组织病理形态变化;采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清中Th1(IFN-γ、IL-2)和Th2(IL-4、IL-10)细胞因子的产生水平；应用TUNEL法检测各组瘤组织的凋亡情况。应用免疫组织化学方法(IHC)检测各组小鼠移植瘤组织中的凋亡蛋白Bax，Bcl-2的表达情况。
　　 结果：
　　 1、XAP中、高剂量组、联合用药组的移植瘤体积和重量明显小于模型对照组（P＜0.05），OCT组、XAP低剂量组的移植瘤体积和重量与模型组相比差异无统计学意义(P＞0.05)，联合用药组的移植瘤体积和重量明显小于单独用药组和模型对照组（P＜0.05）；
　　 2、随着XAP浓度的增加，H22荷瘤的抑制率升高，并呈剂量依赖性关系；单药XAP低剂量组、OCT组与模型对照组相比无差异(P＞0.05)；单药OCT对肿瘤亦有抑制作用。XAP与OCT联合用药组的肿瘤抑制率均高于同等浓度的单药XAP组和单药OCT组。XAP低、中、高剂量联合OCT的q值分别为：0.9197，1.1233，1.2826，提示XAP+OCT联用具有协同作用，其中以XAP高剂量+OCT组对H22荷瘤的抑制效果最显著。
　　 3、脾指数：XAP各剂量组、OCT组、联合用药组的脾指数与模型对照组相比均有一定程度的增加，联合用药组升高脾指数的作用均高于同等浓度的单药XAP组和单药OCT组。
　　 4、HE染色：XAP各剂量组和OCT组较模型组肿瘤坏死范围均有不同程度的增多，其中OCT组与模型对照组相比无差异(P＞0.05)，联合用药组的肿瘤坏死范围明显大于模型对照组。
　　 5、模型组小鼠血清中的IFN-γ、IL-2含量下降，IL-4、IL-10含量升高，呈现Th2型免疫应答状态，给予药物作用后联合用药组纠正细胞因子出现的失衡作用明显优于单独用药组，其中OCT组与模型对照组相比无差异(P＞0.05)。
　　 6、各实验组肿瘤组织的凋亡指数(AI)均大于模型组，其中联合用药组的AI大于各单独用药组(P＜0.05)，OCT组与模型组的AI相比差异无统计学差异(P＞0.05)。同时各用药组均能下调荷瘤小鼠肿瘤组织中凋亡抑制基因Bcl-2的表达，上调凋亡促进基因Bax的表达，其中联合用药组的作用最显著。
　　 结论：
　　 XAP与OCT均可抑制H22肝癌移植癌的生长，联合用药组的抑瘤作用优于单用XAP组与OCT组，两药联合具有协同作用。其中XAP高剂量+OCT为抑瘤的最适药效浓度，其抑制荷瘤生长的作用可能与提高机体免疫功能和诱导肿瘤细胞凋亡有关。

目录

声明

英文缩写词表

前言

1 材料与方法

1.1 材料

1.2 实验方法

1.3 检测指标和方法

2 结果

2.1 荷瘤小鼠一般情况观察

2.2 小鼠肿瘤体积变化

2.3 各组小鼠H22肝癌移植瘤重量、抑瘤率、脾指数

2.4 荷瘤小鼠移植瘤组织病理形态学观察结果

2.5 不同用药组对荷瘤小鼠细胞因子产生的影响

2.6 不同用药组对凋亡指数AI的影响

2.7 不同用药组对Bcl-2、Bax表达的影响

3 讨论

4 结论

参考文献

附图

综述

作者简历

致谢