他克莫司(FK506)对人肾小球系膜细胞细胞周期相关蛋白表达的影响

摘要

目的：探讨他克莫司对体外培养的人肾小球系膜细胞细胞周期相关蛋白cyclinD1、cyclinE及p27kipl表达的影响及可能机制。方法：设正常对照组和他克莫司处理组，他克莫司组设为三个组(浓度分别为10μmol/L，25μmol/L,50μmol/L)。四甲基偶氮唑盐法(MTT)检测他克莫司组处理12小时后肾小球系膜细胞的增殖情况；流式细胞仪检测他克莫司组分别作用12、24、48小时后系膜细胞的上述三种蛋白质及与其结合的CDK2和CDK4表达情况；选择有明显抑制作用的时间点（12小时），westernblot检测上述三种蛋白质的表达情况。
　　 结果：①作用12小时，他克莫司组均能抑制系膜细胞的增殖。②作用12、24、48小时，与对照组相比，浓度为10μmol/L他克莫司对细胞周期蛋白cyclinDI、cyclinE及抑制因子p27kipl的表达无明显影响(p＞0.05)，而浓度为25、50μmol/L时，cyclinD1及cyclinE明显降低，p27kipl表达明显升高，成一定的剂量效应关系(p＜0.05)；且相同浓度的他克莫司在作用三个时间点后，cyclinDI、cyclinE及p27kipl的表达无明显差异(p＞0.05)。③作用12小时，与对照组相比，浓度为10μmol/L他克莫司对周期蛋白依赖性激酶CDK2、CDK4的表达无明显影响(p＞0.05)，而浓度为25、50μmol/L时，CDK2、CDK4的表达明显降低(p＜0.05)。
　　 结论：一定浓度的他克莫司可抑制系膜细胞的增殖，其作用机制至少部分与其影响细胞周期相关蛋白的表达有关。

目录

声明

主要缩略词表

前言

材料与方法

1 材料

2 方法

结果

1 人肾小球系膜细胞的形态学表现

2 MTT法测定不同浓度的他克莫司对系膜细胞增殖的影响

3 流式细胞仪测定他克莫司作用不同时间对cyclinE、cyclinD1、p27kip1表达的影响

4 western blot检测cyclinD1、cyclin E及p27kip1的表达

讨论

1.他克莫司的临床应用

2.他克莫司对人肾小球系膜细胞的影响

3.他克莫司对细胞周期相关蛋白的影响及机制

结论

·综述·

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致谢