SIRT1对大鼠脊髓损伤后神经功能恢复的影响

摘要

目的：探索SIRT1与大鼠脊髓损伤后炎症因子，细胞凋亡及神经功能恢复的关系。
　　 方法：采用改良Allen's法，建立大鼠脊髓钝挫伤模型(T10)，112只SD大鼠被随机分成4组：假手术组（n=16只），模型组(n=32只)，白藜芦醇组（n=32只），对照剂组（n=32只）。脊髓损伤术后立即给予腹腔注射白藜芦醇(resveratrol，RES)，100mg/kg和聚乙二醇硬脂酸酯15(solutol HS 15，SOL)，100mg/kg.进行功能评分的大鼠术后每天给药一次，连续1周。分别采用QT-PCR方法、ELISA方法、TUNEL荧光标记法对4组(SHAM，RES，SOL，SCI)脊髓组织中各时间点SIRT1的表达活性、炎症因子变化和细胞凋亡情况进行检测，并对大鼠术前和术后1天,3天，1周，2周,3周,4周进行BBB scores功能评分。
　　 结果：所有引物都可以成功的扩增出目的片段。RES组，SCI组和SOL组3组SIRT1的表达都有一定升高，RES组SIRTI表达在4h明显增加，在8h达到高峰，与其他两组(SCI组，SOL组)比较在4h，24h,36h差别有统计学意义(P＜0.05)．除假手术组以外各组自8h后SIRT1表达下降。
　　 SCI组大鼠损伤脊髓组织在损伤后4h各炎症性细胞因子表达即明显升高，其中TNF-α和IL-6于损伤后8h达峰值，IL-10在观察时间内呈持续性增高，IL-1β在24h达峰值。SOL组各炎症因子的变化规律与SCI组基本一致，RES组与前两组相比，浓度差别均有统计学意义(P＜0.01)。
　　 与SHAM组相比，SCI组，RES组，SOL组术后1天凋亡细胞明显升高，统计学比较差异性有意义(p＜0.05)。在3天时，SCI组，RES组，SOL组凋亡细胞数持续升高分别达到54.82,38.49,53.24，与其他两组比较，RES组升高较低差异有统计学意义(p＜0.05)，通过定位发现，凋亡主要存在于神经元。
　　 术后1天除假手术组功能评分没有明显改变外，其他3组后肢功能完全丧失0分，从术后第三天到第3周呈现逐渐升高趋势。SCI组，RES组，SOL组比较，前3周功能评分差别没有统计学意义(p＞0.05)。在第四周时，RES组功能评分上升比较明显，与SCI组、SOL组比较差别有统计学意义(P＜0.05)，可见通过上调SIRT1的表达活性，能够促进大鼠脊髓损伤后功能恢复。
　　 结论：SIRT1可能是通过抗炎，抗凋亡作用，促进大鼠脊髓损伤后功能恢复，其具体机制需要进一步实验。