慢性间歇性低氧对牙周炎大鼠IL-6、PGE2及NF-κB含量的影响

摘要

目的：
　　阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（Obstructive Sleep Apnea-Hypopnea Syndrome， OSAHS）是指患者出现了通气不足及呼吸暂停等由上呼吸道阻塞引起的症状，同时伴有白天嗜睡与夜间打鼾、睡眠结构紊乱及高碳酸血症等病征，导致多种并发症及多脏器严重损害，影响患者的生活质量和寿命。国外调查显示，OSAHS是多种全身系统疾病的危险因素，约2％-4%成年人患有此疾病。牙周炎（Periodontitis）是由牙菌斑生物膜引起的、累及牙齿支持组织的慢性进行性、感染性疾病。研究证实，持续性缺氧对牙周膜成纤维细胞的结构和功能造成影响，牙周组织破坏加剧。国外学者研究发现，OSAHS患者较正常人更易患牙周炎，睡眠呼吸暂停（Obstructive Sleep Apnea， OSA）是牙周炎的危险因素之一。而OSAHS病理特征是慢性间歇性低氧(Chronic Intermittent Hypoxia，CIH)-复氧，这为本实验提供了设计思路。因此本研究目的为在CIH条件下建立牙周炎大鼠模型，研究血清中IL-6、PGE2及牙周组织中NF-κB的含量变化，进一步探究二者的相关性。
　　方法：
　　1、建立慢性间歇性低氧条件下牙周炎大鼠模型：选用32只健康清洁级雄性SD大鼠（约200克/6周龄），随机分为4组：A：常氧空白组；B：常氧牙周炎组；C：间歇性低氧组；D：间歇性低氧+牙周炎组。每组8只。采用正畸结扎丝（0.20mm）结扎于B、D两组大鼠上颌双侧第二磨牙，配合高糖饮食。A、C组不作牙周处理，正常饮食，常氧环境。C、D组正常喂养的同时放入低氧舱内建立间歇性低氧环境，每天8小时。实验8周后处死。
　　2、氧浓度检测：测氧仪放入低氧舱中实时监测氧浓度，低氧舱设置：通氮气70s，保持缺氧状态25s，通氧气25s；2mins为一循环。
　　3、牙周检查：建模8周后麻醉大鼠，记录实验牙探诊深度(Probing Depth，PD)及龈沟出血指数(Sulcus Bleeding Index，SBI)。
　　4、样本采集：建模8周后，采集腹主动脉血，大鼠上颌骨经固定、脱钙、包埋、HE染色、封片后，光镜观察并采集图像。
　　5、采用ELISA法检测各组动物血清IL-6和PGE2含量，免疫组织化学法检测牙周组织中NF-κB表达情况。
　　结果：
　　1、一般情况：C、D组大鼠进入低氧舱后，半小时内较为兴奋，行动积极，但随间歇性低氧-复氧循环的进行及通气时间延长出现呼吸加深、加快，腹式呼吸明显，行动迟缓。
　　2、牙周检查：A、C组大鼠未见明显牙周炎表现；B、D组大鼠牙周袋可探及，探诊出血。探诊深度（PD）及龈沟出血指数（SBI）以A组最低，D组最高，B组高于A组、D组高于C组、C组高于A组、D组高于B组，差异有统计学意义（P<0.05）。
　　3、病理学结果：HE染色显示A、C组未见明显牙周炎病理变化，牙槽嵴基本完整；B、D组切片显示结合上皮根方移动，牙槽嵴出现吸收。
　　4、ELISA结果：D组IL-6、PGE2含量最高，A组最低。B组高于A组、D组高于C组、C组高于A组、D组高于B组，差异有统计学意义（P<0.05）。
　　5、免疫组织化学染色结果：A组弱阳性表达，B、C、D强阳性表达。ImagePro Plus软件分析后结果显示，B、C、D组平均光密度（Average Optical Density，AOD）均高于A组；且D组高于C组、D组高于B组，差异有统计学意义（P<0.05）。
　　结论：
　　1、本实验成功建立慢性间歇性低氧大鼠牙周炎模型。
　　2、牙周炎时大鼠血清中IL-6及PGE2含量升高，间歇性低氧可促进实验大鼠血清中IL-6及PGE2进一步增加，从而加重牙周炎症程度。血清中炎症因子与探诊深度（PD）和龈沟出血指数（SBI）的变化趋势一致，能较好的反映间歇性低氧条件下牙周炎症情况。
　　3、间歇性低氧使大鼠牙周组织中NF-κB表达升高，提示NF-κB表达增加与间歇性低氧牙周炎发病过程有关。
　　4、间歇性低氧条件下牙周炎症程度加重，提示间歇性低氧和牙周炎具有相关性。

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前言

第一部分 慢性间歇性低氧对牙周炎大鼠血清中IL-6及PGE2的影响

1 材料与方法

1.1 实验动物

1.2 主要仪器和设备

1.3 实验方法

2 结 果

2.1 行为学改变

2.2 牙周检查

2.3 组织病理学观察

2.4 炎症因子的含量（Pg/ml）

3 讨 论

第二部分 慢性间歇性低氧对牙周炎大鼠牙周组织中NF-κB含量的影响

1 材料与方法

1.1 实验动物

1.2 主要仪器和设备

1.3 实验方法

2 结 果

NF-κB免疫组化结果：

3 讨 论

4 结 论

参考文献

综述:阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合症伴牙周炎大鼠模型的建立及意义

致谢

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