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体外冲击波对伴骨质疏松的骨关节炎模型软骨及软骨下骨结构、代谢及功能的影响

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前言

第一部分 骨质疏松模型和骨关节炎模型制备

1 材料与方法

1.1一般材料

1.2实验方法

1.3统计方法

2 结 果

2.1 骨质疏松检测结果

2.2 骨关节炎检测结果

3 小结

第二部分 ESWT对伴骨质疏松的骨关节炎模型软骨及软骨下骨结构、代谢及功能的影响

1材料与方法

1.1一般材料

1.2 实验方法

1.3统计方法

2 结 果

2.1 关节软骨检测结果

2.2 软骨下骨结构检测

2.3大鼠步态分析

3 讨 论

3.1动物模型的选择

3.2关节软骨的改善

3.3软骨下骨的结构变化

3.4.步态功能的改善

3.5 不足与展望

4结 论

参考文献

综述:软骨下骨在骨性关节炎进程中的影响

致谢

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摘要

第一部分:骨质疏松模型和骨关节炎模型的制备
  目的:
  分别制备大鼠骨质疏松和骨关节炎模型。方法:
  8周龄雌性SD大鼠32只,分为4组:A组(假去势组),B组(OP组);C组(假关节炎组),D组(OA组)。B组大鼠去势,术后12周时通过双能X线骨密度仪测定腰椎和股骨的BMD以及通过三点弯曲试验观察股骨力学特性。 D组行改良Hulth法,4周时通过关节大体变化和组织切片来验证骨关节炎模型。
  结果:
  对于A组和B组:去势12周后,B组大鼠腰椎和股骨的BMD都低于A组且有统计学差别(P<0.05);B组大鼠股骨承受的最大应力明显下降(P<0.05)。对于C组和D组:术后4周,相比C组,D组关节周围滑膜肿胀以及软骨表面明显退变;HE染色切片也显示:D组软骨结构和细胞损伤严重,Mankin评分明显高于C组(P<0.05)。
  结论:
  通过去势法12周是成功制备大鼠OP模型的有效方法,通过改良Hulth法(ACL+MM)4周可以成功制备骨关节炎模型。
  第二部分 ESWT对伴骨质疏松的骨关节炎模型软骨及软骨下骨结构、代谢及功能的影响
  目的:
  ESWT对伴骨质疏松的骨关节炎模型软骨及软骨下骨结构、代谢及功能的影响。方法:
  8周龄雌性SD大鼠36只,分为3组:Sham组,OPOA组,ESWT组。OPOA组和ESWT组均去势,在12周验证骨质疏松模型后,通过改良Hulth法制备骨关节炎模型。改良Hulth法术后1周,ESWT组开始在软骨下骨部位给予ESW干预,1周1次,共4次(能量1.6bar,脉冲1000次,频率为5Hz)。干预4周后通过组织形态学和生物力学来观察关节软骨的变化;通过Micro-CT和免疫组化来观察软骨下骨的微结构变化;通过步态分析来观察大鼠的功能变化。
  结果:
  相比Sham组,OPOA组的关节周围滑膜增生,软骨表面可见裂纹,且Mankin和toluidine blue评分显著提高。而ESWT组较OPOA组软骨退变有所改善,Mankin也明显降低。生物力学显示:OPOA组的应力应变曲线位移和蠕变显著性增加相对于sham组,经ESW干预4周后,可见关节软骨的力学特性有所恢复,应力应变曲线位移(除了0.02N)和蠕变显著性下降。Micro-CT结果显示:OPOA组软骨下骨微结构明显破坏, BV/TV、Tb.N和Tb.Th都明显减少而Tb.Sp明显增加,ESW干预4周后,BV/TV、Tb.N和Tb.Th都明显增加而Tb.Sp显著性下降。免疫组化显示:OPOA组BMP-2和Osterix蛋白表达明显减少相对于Sham组。经ESW治疗后,BMP-2和Osterix表达都显著性增加。步态分析结果显示:相对于Sham组,OPOA组支撑时相(stance phase),摆动速度(swing speed),和单足支撑时相(single stance phase)显著性缩短。在ESW干预4周后,大鼠步态状态有一定的改善,ESWT组支撑时相(stance phase),摆动速度(swing speed)和单足支撑时相(single stance phase)显著性变长,同时摆动时相(swing phase)显著性缩短。
  结论:
  ESW通过干预软骨下骨,既延缓和阻止了OPOA大鼠关节软骨的退变,也从步态方面改善了大鼠的运动功能。

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