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【6h】

白藜芦醇对胃癌细胞及其表达DNA甲基转移酶和组蛋白脱乙酰化酶的影响及意义

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声明

英文缩写词表

前言

1 实验材料

1.1细胞株

1.2试剂

1.3实验仪器

2 实验方法与步骤

2.1培养基配置

2.2胃癌细胞的培养

2.3胃癌细胞的传代

2.4胃癌细胞的复苏

2.5实验分组

2.6流式细胞仪测凋亡

2.7流式细胞检测细胞周期

2.8免疫细胞化学

2.9 统计软件分析

3 结 果

3.1流式细胞仪测凋亡

3.2流式细胞仪测细胞周期

3.3免疫细胞化学

4 讨 论

5 结 论

参考文献

附录

综述:表观遗传学在肿瘤中的作用

致谢

个人简历

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摘要

目的:
  探讨白藜芦醇(resveratrol,Res)对AGS胃癌细胞及其表达DNA甲基转移酶(DNA methyltransferase,DNMTs)和组蛋白脱乙酰化酶(Histone deacetylase,HDACs)的影响及意义。
  方法:
  将培养好的胃癌细胞分别用浓度为空白、25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L的Res配置的培养基培养24小时后分别用流式仪测验AGS的凋亡及周期阻滞状态;免疫细胞化学测DNMT1、DNMT3a、DNMT3b、HDAC2、HDAC11表达情况。
  结果:
  培养24h后对照组、25μmol/L组、50μmol/L组、100μmol/L组用流式细胞仪测凋亡结果分别为(1.48±0.15、12.77±0.26、26.59±0.43、38.59±0.23,F=9585.25,p<0.01);流式细胞仪测细胞周期G1期结果分别为(44.47±0.41、52.15±0.34、55.22±0.32、71.48±0.40,F=2807.43,p<0.01);免疫细胞化学检测DNMTs和HDACs灰度值结果分别是DNMT1(191.70±0.60、197.37±0.73、201.88±0.29、207.97±0.81,F=347.21,p<0.01)、DNMT3a(187.64±0.96、197.21±0.63、203.35±0.74、208.17±0.30,F=481.49,p<0.01)、DNMT3b(191.69±0.65、196.36±0.44、201.04±0.37、205.69±0.46, F=452.17,p<0.01)、HDAC2(184.58±1.01、193.32±0.57、200.60±0.84、205.12±0.53, F=414.68,p<0.01)、HDAC11(189.94±0.70、194.14±0.99、201.71±0.73、207.46±0.77,F=445.69,p<0.01)。
  结论:
  1.一定浓度范围内,Res能够抑制DNMTs和HDACs的产生,并加快胃癌细胞凋亡,并且可以将周期阻滞于G1期;
  2.Res发挥抗肿瘤作用存在一定的浓度相关性。

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