益肾胶囊对高糖环境下小鼠足细胞自噬的影响

摘要

目的：
　　观察益肾胶囊含药血清对高糖环境下小鼠肾小球足细胞自噬的影响。
　　方法：
　　分别以益肾胶囊0.625g/kg·d、1.25g/kg·d、2.5g/kg·d及贝那普利30mg/kg·d的剂量给予大鼠灌胃7天，经腹主动脉取血，离心、灭菌制备不同浓度的益肾胶囊含药血清及贝那普利含药血清，对体外培养的小鼠肾小球足细胞进行分组干预，细胞分为：正常组（NG）、高糖组（HG）、低浓度益肾胶囊含药血清组（LY）、中浓度益肾胶囊含药血清组（MY）、高浓度益肾胶囊含药血清组（HY）、贝那普利含药血清组（BP）。Western Blot检测自噬相关LC3Ⅱ蛋白与泛素结合蛋白p62（p62／SQSTMl）蛋白的表达变化。透射电镜下观察各组足细胞内自噬体的变化。光学显微镜观察各组足细胞形态。
　　结果：
　　1.Western Blot检测结果：各细胞组LC3Ⅱ蛋白的表达：与NG相比，HG足细胞自噬相关蛋白LC3Ⅱ表达减少（p<0.05）；与HG相比，各药物干预组LC3Ⅱ蛋白表达水平均呈上升趋势，其中HY、BP显著升高（p<0.05）；而HY与BP相比差异无统计学意义（p＞0.05）。各细胞组p62蛋白的表达：与NG相比， HG足细胞p62蛋白表达增多（p<0.05）；与HG相比，各药物干预组p62蛋白表达水平均呈下降趋势，其中HY、BP显著降低（p<0.05）；而HY与BP相比差异无统计学意义（p＞0.05）。
　　2.透射电镜观察各细胞组自噬体结果：与NG相比，HG细胞内自噬体数目明显减少（p<0.05），与HG相比，各药物干预组自噬体数目呈上升趋势，其中HY、BP显著升高（p<0.05）；而HY与BP相比差异无统计学意义（p＞0.05）。
　　3.光学显微镜观察各组足细胞形态结果：NG足细胞贴壁生长，从胞体延伸出许多突起。HG较NG有更多足细胞从培养皿底部脱落，贴壁细胞足突缩短。LY、MY、HY、BP与HG足细胞相比在形态上前者更接近NG；其中HY与BP细胞增殖更旺盛。
　　结论：
　　高糖可导致足细胞自噬障碍，而益肾胶囊可通过改善其自噬障碍，进而发挥足细胞保护的作用。

目录

声明

常用中文及英文缩写词对照表

前言

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验细胞

1.1.2 实验动物

1.1.3 实验药物与主要试剂

1.1.4 实验主要仪器

1.2 实验方法

1.2.1 细胞培养

1.2.2 细胞传代

1.2.3 细胞收集

1.2.4 细胞冻存

1.2.5 细胞分组

1.2.6 Western印迹法检测

1.2.7 透射电镜观察足细胞自噬改变

1.2.8 统计学方法

2 结 果

2.1 各组足细胞自噬相关LC3Ⅱ蛋白表达

2.2 各组足细胞p62蛋白表达

2.3 各组足细胞自噬体观察

2.4 光学显微镜下观察各组足细胞形态

3 讨 论

4 结 论

参考文献

综述：自噬在糖尿病肾病肾小球足细胞损伤中的研究进展

致谢

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