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第一章引言
1.褐藻胶多糖和低聚糖的生物学活性研究
1.1褐藻胶多糖及生物活性物质的研究
1.2褐藻胶低聚糖及其生物学活性的研究
2.褐藻胶裂解酶及其分子生物学研究
2.1褐藻胶裂解酶
2.2褐藻胶裂解酶基因的克隆与功能鉴定研究
2.3褐藻胶裂解酶的构-效关系研究
3.褐藻胶的微生物合成及其分子生物学研究
3.1细菌合成褐藻胶的遗传学基础
3.2细菌中褐藻胶的生物合成途径
4.褐藻胶的生物转化
4.1酶法制备褐藻胶低聚糖
4.2微生物生物合成与修饰的研究
第二章褐藻胶裂解酶新基因克隆、序列分析和重组酶的表达、纯化与性质的初步研究
1.实验材料
2.实验方法
2.1海水环境基因组DNA质粒文库的构建
2.2褐藻胶裂解酶新基因(a/gL)的筛选
2.3阳性克隆D45中外源基因片段的序列分析
2.4 algL基因的重组、表达和纯化
2.5重组褐藻胶裂解酶的初步鉴定
3实验结果
3.1褐藻胶裂解酶基因的生物信息学分析与简并PCR引物
3.2海水环境基因组DNA基因文库的构建和96孔板法筛选
3.3重组质粒pD45的酶切鉴定与序列分析
3.4 algL基因和AlgL蛋白的序列分析
3.5 pLyase-A重组菌诱导表达条件的优化
3.6含His-标签AlgL的大量表达和纯化
3.7蛋白质浓度的测定
3.8己糖醛酸浓度的测定
3.9 AlgL活性的紫外吸收法测定
3.10 AlgL底物特性的PAGE分析
4讨论
4.1实验的技术路线
4.2海水环境基因组DNA质粒文库的构建
4.3 algL基因的筛选
4.4阳性克隆D45外源基因的序列分析
4.5重组AlgL的表达、纯化
4.6重组AlgL活性的分析
第三章:海洋假单胞细菌的筛选、16S rRNA鉴定和褐藻胶生物合成操纵元基因全序列的克隆与序列的分析
1.实验材料
2.实验方法
2.1 algL基因来源菌株的筛选和鉴定
2.2褐藻胶生物合成操纵元基因全序列的克隆与序列分析
3.结果与分析
3.1海洋微生物的筛选
3.2菌株的基本特征
3.3 16S rDNA序列与系统发育树
3.4操纵元全基因序列的克隆
3.5全操纵元基因序列的分析
3.6操纵元5'-调控区DNA序列的分析
4.讨论
4.1微生物的筛选策略
4.2菌种的16S rDNA鉴定
4.3操纵元序列特征的分析
4.4操纵元的转录机制分析
总结与展望
参考文献
致谢
发表文章情况