蛤毒素在双壳贝类中的特征及在黄道蟹（Cancer pagurus）体内的代谢规律研究

摘要

双壳贝类及蟹类是重要的食品源，而且日益成为重要的国际贸易品种。但双壳贝类及蟹类也存在着食用安全隐患，其中贝毒素是重要的影响因素。蛤毒素是贝毒素的一种。本论文运用主动吸附的方法从黄海胶州湾海水中提取蛤毒素，研究了毒素的特征及时间变动规律；从黄海胶州湾养殖区采集了紫贻贝M.edulis和栉孔扇贝C.farreri样品，分析了其中蛤毒素的特征；并以含蛤毒素的贻贝养殖黄道蟹C.pagurus，研究了蛤毒素在蟹中的富集和代谢规律，得到如下结论。 1.不同国家海域海水中的蛤毒素具有不同的特征。在我国黄海区胶州湾的海水中存在PTX-2、PTX-2 SA和7-epi--PTX-2 SA，而不存在PTX-11、PTX-12a和PTX-12b。在2006年7月，蛤毒素已处于较高的浓度水平，8月1日起下降，至8月29日浓度已降到较低的水平。 2.我国黄海胶州湾的紫贻贝和栉孔扇贝中存在PTX-2、PTX-2SA和7-epi-PTX-2SA，没有发现PTX-11、PTX-12a和PTX-12b。在8月中旬至9月底期间，紫贻贝和栉孔扇贝中蛤毒素浓度较低，对食用者可能造成的危害较小。本论文首次揭示了我国海域中蛤毒素的特征，探讨了藻类、海水、贝类中蛤毒素之间的联系及时空关系。但要全面了解我国不同海域中蛤毒素的特征，有待更加全面的取样和分析。 3.黄道蟹通过摄食含蛤毒素的紫贻贝而富集蛤毒素。蛤毒素代谢为一种未知的同系物，暂时命为PTX-m。蛤毒素及其代谢物可以被较快地排出体外。PTX-2、PTX-2 SA、7-epi-PTX-2 SA、PTX-12a、PTX-12b和PTX-m在黄道蟹体内的半衰期为6至7.5天。暂养42天之后，黄道蟹肝胰腺中蛤毒素的浓度可小于1 μg/kg，低于欧盟食品安全限量。 4.蛤毒素代谢物PTX-m与PTX-11具有相同分子量和相似的二级质谱离子碎片。PTX-m分子中的OH基团应当处于PTX-m分子构架中C16-C33的部分。对代谢产物的分子结构及毒理学有待进一步研究。

目录

文摘

英文文摘

声明

0前言

0.1贝类毒素概述

0.1.1贝类毒素的定义

0.1.2贝毒素的分类

0.1.3贝毒素的食用安全限量法规

0.1.4贝类毒素的检测技术

0.2蛤毒素的研究进展

0.2.1蛤毒素的起源

0.2.2蛤毒素的化学性质及分子结构

0.2.3蛤毒素的毒理学研究

0.2.4蛤毒素的食用安全限量

0.2.5鳍藻中蛤毒素特征

0.2.6双壳贝类中的蛤毒素特征

0.2.7蛤毒素的生物转化

0.2.8贝类样品中蛤毒素的测试方法

0.3螃蟹中的贝类毒素研究进展

0.3.1螃蟹中贝类毒素的特征

0.3.2腹泻性贝毒在蟹体内的积累和代谢规律

0.3.3麻性贝毒在蟹体内的积累和代谢规律

0.3.4蛤毒素在螃蟹体内的生物转化

0.4国内蛤毒素研究进展及存在的问题

0.4.1国内蛤毒素研究进展

0.4.2存在的问题及建议

0.5本论文的主要研究内容及目标

0.5.1研究内容

0.5.2研究目标

0.6本论文的研究思路和技术路线

0.6.1研究思路

0.6.2技术路线

1黄海胶州湾海水中蛤毒素特征及变化规律研究

1.0前言

1.1材料与方法

1.1.1仪器与设备

1.1.2试剂

1.1.3实验方法

1.2结果

1.2.1蛤毒素标准液溶质谱分析

1.2.2海水中蛤毒素质谱分析

1.2.3海水中蛤毒素含量

1.3.讨论

1.3.1海水中蛤毒素组份特征

1.3.2海水中蛤毒素的产毒藻源

1.3.3海水中蛤毒素含量及其变化趋势

1.4总结

2黄海胶州湾紫贻贝M.edulis和栉孔扇贝C.farreri中蛤毒素特征研究

2.0前言

2.1材料与方法

2.1.1仪器与设备

2.1.2试剂

2.1.3贝类样品的采集

2.1.4贝类组织中蛤毒素提取

2.1.5高压液相色谱—串接质谱分析

2.2结果

2.2.1蛤毒素标准液溶液相色谱-质谱分析

2.2.2紫贻贝M.edulis中蛤毒素液相色谱-质谱分析

2.2.3栉孔扇贝C.farreri中蛤毒素液相色谱-质谱分析

2.2.4紫贻贝和栉孔扇贝样品中蛤毒素含量

2.3讨论

2.3.1紫贻贝M.edulis和栉孔扇贝C.farreri中蛤毒素的特征

2.3.2紫贻贝和栉孔扇贝中的蛤毒素对食用者的危害

2.4结论

3蛤毒素在黄道蟹(Cancer pagurus)体内的积累和代谢规律研究

3.0前言

3.1材料与方法

3.1.1仪器与设备

3.1.2试剂

3.1.3黄道蟹的养殖和样品准备

3.1.4黄道蟹肝胰腺中蛤毒素的提取

3.1.5高压液相色谱—串接质谱分析

3.2结果

3.2.1蛤毒素标准色谱图与工作曲线

3.2.2紫贻贝中的蛤毒素含量

3.2.3黄道蟹肝胰腺中蛤毒素含量

3.3讨论

3.3.1蛤毒素在黄道蟹中的积累规律

3.3.2蛤毒素在黄道蟹中的消除规律

3.4.结论

4蛤毒素在黄道蟹体内的代谢产物研究

4.0前言

4.1材料与方法

4.1.1仪器与设备

4.1.2试剂

4.1.3黄道蟹的养殖和样品准备

4.1.4.黄道蟹肝胰腺中蛤毒素的提取

4.1.5黄道蟹肝胰腺中蛤毒素代谢产物PTX-m的分离与纯化

4.1.6高压液相色谱—串接质谱分析

4.1.7高压液相色谱—离子阱质谱分析

4.2.结果

4.2.1紫贻贝和黄道蟹中的蛤毒素

4.2.2 PTX-m的二级质谱分析

4.3讨论

4.3.1 PTX-m的物质性质

4.3.2 PTX-m的二级质谱解析及分子结构特点

4.4.结论

5蛤毒素代谢物在黄道蟹(Cancer pagurus)体内的消除规律

5.0前言

5.1材料与方法

5.1.1仪器与设备

5.1.2试剂

5.1.3黄道蟹的养殖和样品准备

5.1.4黄道蟹肝胰腺中蛤毒素的提取

5.1.5高压液相色谱—串接质谱分析

5.2结果

5.2.1PTX-11标准液的色谱图与工作曲线

5.2.2黄道蟹肝胰腺中蛤毒素含量

5.3讨论

5.3.1蛤毒素PTX-m在黄道蟹中的积累规律

5.3.2蛤毒素在黄道蟹中的消除规律

5.3.4结论

6.总结

7.展望

参考文献

攻读博士学位期间发表和接收的论文

致谢