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1 文献综述
1.1 鳗弧菌概述
1.1.1 铁吸收系统毒力因子
1.1.2 细胞外溶血素毒力因子
1.1.3 细菌鞭毛蛋白毒力因子
1.1.4 胞外蛋白酶侵袭因子
1.1.5 细胞表面成分
1.2 多重PCR技术
1.2.1 多重PCR技术原理
1.2.2 多重PCR技术要素
1.2.3 多重PCR技术的进展
1.2.4 多重PCR技术在细菌检测中的应用
1.3 基因芯片技术
1.3.1 基因芯片的产生背景
1.3.2 基因芯片的概念和原理
1.3.3 基因芯片的应用
1.4 核酸扩增新技术
1.4.1 环介导等温扩增技术
1.4.2 赖解旋酶恒温基因扩增技术
1.4.3 固相PCR技术
1.4.4 指数富集配体的系统进化技术
1.4.5 SOLEXA高通量测序技术
1.4.6 Taqman实时荧光定量PCR
1.4.7 总结
1.5 本文研究目的及研究内容
2 多重PCR结合基因芯片检测鳗弧菌的6个毒力基因
2.1 材料与方法
2.1.1 菌种来源及引物探针的合成
2.1.2 细菌总DNA提取
2.2 仪器和设备
2.3 多重PCR体系的建立
2.3.1 常规PCR反应体系和反应条件
2.3.2 多重PCR扩增条件的优化
2.3.3 多重PCR灵敏度检测
2.4 多重PCR产物与膜芯片的杂交
2.4.1 地高辛标记多重PCR扩增目的片断
2.4.2 膜芯片的制备
2.4.3 预杂交和杂交
2.4.4 杂交后显色
2.4.5 芯片检测结果的判读
2.5 结果
2.5.1 单重PCR反应体系及结果
2.5.2 多重PCR反应体系的建立
2.5.3 多重PCR反应体系的检测灵敏度
2.5.4 多重PCR反应产物与膜芯片的杂交
2.6 讨论
3 新核酸扩增技术检测鳗弧菌6个毒力基因的初步探索
3.1 Taqman Real-Time PCR技术
3.1.1 材料
3.1.2 方法
3.1.3 结果
3.1.4 讨论
3.2 固相PCR技术
3.2.1 材料
3.2.2 方法
3.2.3 结果
3.2.4 讨论
3.3 赖解旋酶等温扩增技术
3.3.1 材料
3.3.2 方法
3.3.3 结果
3.3.4 讨论
4 小结
参考文献
附录
致谢
个人简历
发表的学术论文