“劳倦过度，房室不节”致肾阳虚及补肾治疗对小鼠HPA轴及睾丸端粒酶活性影响的研究

摘要

目的：探讨“劳倦过度、房室不节”所致肾阳虚小鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴功能变化，研究肾阳虚证及补肾治疗对睾丸端粒酶活性和端粒酶催化亚基（Tert）表达的影响，为肾本质研究及“肾主生殖”理论提供现代科学依据。 方法：复制“劳倦过度、房室不节”肾阳虚小鼠模型。采用电镜、光镜、放射免疫分析、酶联免疫分析、免疫组织化学分析、原位末端标记（TUNEL）、反转录PCR（RT-PCR）、活性光密度酶联免疫测定（TRAP-ELISA）等方法，对正常、肾阳虚、补肾阳药物三组小鼠进行肾上腺皮质的组织形态学及超微结构观察、肾上腺轴激素含量测定、肾上腺组织凋亡基因表达及凋亡率测定、生殖能力检测、睾丸组织端粒酶活性及端粒酶催化亚基检测。 结果：“劳倦过度、房室不节”肾阳虚小鼠肾上腺脏器系数下降，肾上腺组织形态及超微结构改变，下丘脑-垂体-肾上腺轴激素水平下降，肾上腺组织Caspase3、Fas基因表达异常及凋亡率下降；生殖力减弱，睾丸端粒酶Tert表达下降，端粒酶活性降低。金匮肾气丸对这种异常有一定反向调节作用。 结论：“劳倦过度、房室不节”肾阳虚小鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴功能紊乱，肾上腺组织形态及超微结构被破坏；睾丸内精原细胞及精母细胞端粒酶催化亚基的表达和端粒酶活性下降，生殖力降低。金匮肾气丸可以提高下丘脑-垂体-肾上腺轴激素水平、改善肾上腺形态结构、增强端粒酶活性表达，改善下丘脑-垂体-肾上腺轴、性腺轴功能紊乱，提高小鼠生殖力。

目录

文摘

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声明

引 言

第一部分 “劳倦过度，房室不节”致肾阳虚及补肾治疗对小鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴影响的研究

实验一 “劳倦过度、房室不节”肾阳虚小鼠模型的复制

一、材料与方法

二、结果

实验二 肾阳虚小鼠肾上腺组织学观察

一、材料与方法

二、结果

实验三 肾阳虚小鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴激素含量的测定

一、材料与方法

二、结果

实验四 肾阳虚小鼠肾上腺组织Bax、Bcl-2、Caspase3、Fas、FasL表达

一、材料与方法

二、结果

实验五 肾阳虚小鼠肾上腺组织凋亡细胞原位末端标记(TUNEL)

一、材料与方法

二、结果

第二部分 “劳倦过度，房室不节”致肾阳虚及补肾治疗对小鼠睾丸端粒酶活性影响的研究

实验六 肾阳虚小鼠生殖力试验

一、材料与方法

二、结果

实验七 肾阳虚小鼠睾丸组织端粒酶催化亚基(mTERT)表达的RT-PCR检测

一、材料与方法

二、结果

实验八 肾阳虚小鼠睾丸组织端粒酶活性检测

一、材料与方法

二、结果

讨 论

一、祖国医学对“肾阳虚证”的认识

(一)祖国医学对“肾”的生理功能的认识

(二)祖国医学对肾阳及肾阳虚认识

二、肾阳虚证下丘脑-垂体-肾上腺轴的现代研究

(一)“肾阳虚证”的现代研究现状

(二)“肾阳虚证”下丘脑-垂体-肾上腺轴的研究现状

三、“劳倦过度、房室不节”肾阳虚动物模型的选择

(一)肾阳虚证病理动物模型

(二)肾阳虚证病因动物模型

四、金匮肾气丸的作用功效

(一)组成方药的功用及方义

(二)金匮肾气丸的作用功效

(三)金匮肾气丸的临床应用

五、肾阳虚证下丘脑-垂体-肾上腺轴神经内分泌调节

六、“劳倦过度、房室不节”肾阳虚模型与肾上腺组织的细胞凋亡

七、“肾阳虚证”下丘脑-垂体-性腺轴及“肾主生殖”的现代研究

(一)理论研究

(二)作用机理研究

八、端粒与端粒酶的研究

(一)端粒与端粒酶

(二)端粒与生殖

(三)端粒与衰老和细胞凋亡

(四)端粒与肿瘤

(五)端粒酶活性的检测方法

九、本研究的创新点和进一步的研究设想

(一)本研究的创新点

(二)进一步的研究设想

结 语

参考文献

附 录

致 谢

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