以≤1000Da提取物探讨中药复方成分提取用SBE法研究的基本模式

摘要

目的:以黄连解毒汤为例,半仿生提取法(SBE法)制备≤1000Da提取物为最终产物,探讨中药复方药效物质用SBE法研究的基本模式。
　　方法:①首先对黄连解毒汤进行基源、性状鉴定与质量标准研究;②采用均匀设计法,以盐酸小檗碱、黄芩素、栀子苷、总生物碱、总黄酮、HPLC梯度洗脱总积分面积、≤1000Da提取物等7项指标,综合评判,优选SBE法制备≤1000Da提取物的提条件;③按“君、臣、佐、使”将方药分为15种组合,以上述相同的指标和评判方法,优选提取时药材较佳组合方式;④在乙醇浓度30％-80%范围内,采用比例分割法,以上述相同的指标和评判方法,优选方药醇提制备≤1000Da提取物较佳浓度;⑤以相同的指标和评判方法,作方药3种方法(SBE法、WE法、AE法)≤1000Da提取物的多指标成分比较;⑥综合评判,确定该方药成分提取较佳方法及工艺参数。
　　结果:①黄连解毒汤方中所用饮片皆符合《中国药典》.2005版一部各有关项下规定;②SBE法制备该方药≤1000Da提取物的条件:3煎用水pH依次为6.0、7.5、8.5,提取时间依次为2h、1h、1h;③SBE法制备该方药≤1000Da提取物,以黄连和栀子、黄芩和黄柏分别提取,再将两种提取液合并为佳;④AE法制备该方药≤1000Da提取物,乙醇浓度以60%为佳;⑤对该方药3种方法(SBE法、WE法、AE法)制得的≤1000Da提取物作多指标成分(盐酸小檗碱、黄芩素、栀子苷、总生物碱、总黄酮、HPLC梯度洗脱总积分面积、≤1000Da提取物)比较,结果以SBE法为优。
　　结论:黄连解毒汤方药成分提取以用SBE法,将黄连和栀子、黄芩和黄柏分别提取,再将两种提取液合并,制得≤1000Da提取物为佳。对SBE法、AE法、WE法制得的3种≤1000Da提取物,作多指标(盐酸小檗碱、黄芩素、栀子苷、总生物碱、总黄酮、HPLC梯度洗脱总积分面积、≤1000Da提取物量)综合评判比较,结果也以SBE为佳。本文建立的“以≤1000Da提取物为最终产物”SBE法成分研究模式,能体现中药整体、综合、客观、模糊的特点,为选用现代药物新剂型提供了技术支撑,拓展了中药现代化研究开发的思路与方法,具有较高的科学性和实用性。

目录

提要

Abstract

引言

第1章 文献综述

1 黄连解毒汤的方源与方解研究

2 黄连解毒汤方药药理研究进展

3 中药半仿生提取法的研究进展

3.1 中药半仿生提取法的特点

3.2 中药半仿生提取法的关键技术工艺

4 超滤膜滤过技术在中药中的应用研究

4.1 膜滤过技术的特点

4.2 膜滤过技术在中药中的应用

4.3 膜滤过技术存在的问题及对策

5 血清药理学在中药中的应用研究

5.1 血清药理学研究的现状

5.2 血清药理学存在问题与展望

6 指纹图谱技术在中药中的应用研究

6.1 指纹图谱的特点

6.2 指纹图谱的建立与评价模式

6.3 指纹图谱的意义与展望

7 本课题研究的目的和意义

7.1 研究目的

7.2 研究意义

第2章 黄连解毒汤方药的质量鉴测研究

1 仪器与药品

2 方法与结果

2.1 黄连质量鉴定

2.2 黄芩质量鉴定

2.3 黄柏质量鉴定

2.4 栀子质量鉴定

3 小结与讨论

第3章 黄连解毒汤方药半仿生提取法工艺条件优选

1 仪器与药品

2 方法与结果

2.1 实验设计

2.2 样品液的制备

2.3 供试液的制备

2.4 对照液的制备

2.5 盐酸小檗碱含量测定

2.6 总生物碱含量测定

2.7 黄芩素含量测定

2.8 总黄酮含量测定

2.9 栀子苷含量测定

2.10 HPLC总面积测定

2.11 ≤1000Da提取物测定

2.12 数据综合评判

3 验证性试验

4 小结与讨论

第4章 黄连解毒汤方药提取药材组合方式的优选

1 仪器与药品

2 方法与结果

2.1 方药组合方式

2.2 样品液的制备

2.3 供试液的制备

2.4 对照液的制备

2.5 盐酸小檗碱含量测定

2.6 总生物碱含量测定

2.7 黄芩素含量测定

2.8 总黄酮含量测定

2.9 栀子苷含量测定

2.10 HPLC总面积测定

2.11 ≤1000Da提取物测定

2.12 数据综合评判

3 验证性实验

4 小结与讨论

第5章 黄连解毒汤方药醇提乙醇浓度的优选

1 仪器与药品

2 方法与结果

2.1 样品液制备

2.2 供试液的制备

2.3 对照液的制备

2.4 盐酸小檗碱含量测定

2.5 总生物碱含量测定

2.6 黄芩素含量测定

2.7 总黄酮含量测定

2.8 栀子苷含量测定

2.9 HPLC总面积测定

2.10 ≤1000Da提取物测定

2.11 数据综合评判

3 验证性实验

4 小结与讨论

第6章 黄连解毒汤方药3种方法提取液多指标成分比较

1 仪器与药品

2 方法与结果

2.1 样品液制备

2.2 供试液的制备

2.3 对照液的制备

2.4 盐酸小檗碱含量测定

2.5 总生物碱含量测定

2.6 黄芩素含量测定

2.7 总黄酮含量测定

2.8 栀子苷含量测定

2.9 ≤1000Da提取物测定

2.10 数据综合评判

3 小结与讨论

结语

参考文献

致谢