快律宁胶囊及其含药血清对大鼠心室肌细胞内钙离子平均荧光强度的作用

摘要

目的:观察快律宁胶囊(以下简称为KLN)及其含药血清对单个大鼠心室肌细胞内钙离子(Ca2+)平均荧光强度的影响。方法:将SD大鼠随机分为空白对照组和KLN高、中、低剂量组,分别灌胃给药后取血,制备KLN含药血清。分离单个大鼠心室肌细胞,Fluo-3/AM探针进行荧光标记,用激光共聚焦显微镜扫描观察,于第2次和第3次扫描之间加入药物。观察KLN对静息细胞胞浆Ca2+平均荧光强度和对心肌细胞钙库释放的影响,以及KLN含药血清对静息细胞胞浆Ca2+平均荧光强度的影响。结果:①与对照组相比,KLN高、中、低剂量均能明显升高静息细胞胞浆Ca2+平均荧光强度(P＜0.05),均随时间延长呈逐渐增高趋势,升高的程度呈剂量依赖性。②与对照组相比,KLN高、中剂量能明显升高无钙台氏液中心肌细胞胞浆Ca2+平均荧光强度(P＜0.01),促进心肌细胞钙库释放,随时间推移,心肌细胞内Ca2+平均荧光强度呈逐渐上升趋势,高剂量KLN的作用与中剂量相比更加迅速、显著。而低剂量KLN对心肌细胞内Ca2+平均荧光强度的影响与对照组相比无显著性差异(P＞0.05)。③与正常血清对照组相比,KLN高、中剂量含药血清可明显增加静息细胞胞浆Ca2+平均荧光强度(P＜0.01),而低剂量对静息细胞胞浆Ca2+平均荧光强度的影响则与正常血清对照组无明显统计学差异(P＞0.05)。结论:KLN既能促进心肌细胞自发的外钙内流,又能促进心肌细胞内的钙库释放。前者说明KLN抗心律失常作用与其对Ca2+通道的作用有关,而后者说明本药还可能具有正性肌力作用。KLN含药血清的作用效果与直接向细胞外液中加入KLN结果一致。

目录

提要

Abstract

引言

研究背景

1 历代中医家对心悸的认识

1.1 《黄帝内经》中心悸相关记载

1.2 张仲景对心悸的认识

1.3 隋唐时期心悸证治的发展

1.4 宋金元时期心悸证治的发展

1.5 明清时期心悸证治的发展

1.6 当代名医治疗心悸经验

2 现代医学对快速性心律失常的认识

2.1 快速性心律失常的发生机制

2.2 快速性心律失常的治疗

3 快速性心律失常的病机及治法

3.1 阴虚火旺是快速性心律失常的重要病机

3.2 清心火、养心阴、安心神是快速性心律失常的重要治法

实验研究

1 实验材料

1.1 动物选择

1.2 主要设备和仪器

1.3 主要试剂及溶液配制

2 实验方法

2.1 快律宁含药血清的制备

2.2 单个大鼠心室肌细胞的分离

2.3 荧光探针标记

2.4 钙离子平均荧光强度变化测定

2.5 数据处理及统计学方法

3 实验结果

3.1 快律宁胶囊对静息细胞胞浆钙离子平均荧光强度的影响

3.2 快律宁胶囊对心肌细胞钙库释放的影响

3.3 快律宁含药血清对静息细胞胞浆钙离子平均荧光强度的影响

讨论

1 心室肌细胞内钙离子平均荧光强度测定原理

2 钙离子与心肌细胞电生理

2.1 钙离子与心肌细胞动作电位

2.2 钙离子与心肌收缩性

3 细胞膜钙离子通道

4 快律宁胶囊组方分析及现代药理研究

4.1 快律宁胶囊处方分析

4.2 快律宁胶囊中单味中药对细胞内钙离子作用的现代药理研究

5 血清药理学研究

5.1 运用血清药理学方法研究中药药理的意义

5.2 动物选择

5.3 给药方法

5.4 含药血清浓度控制

5.5 血清添加量

5.6 血清的处理

6 快律宁胶囊对心室肌细胞内钙离子平均荧光强度的作用

7 快律宁含药血清对心室肌细胞内钙离子平均荧光强度的作用

结语

参考文献

综述

参考文献

附录

致谢