Ⅰ中亚滨藜盐诱导启动子的分离及功能鉴定;Ⅱ胁迫诱导盐地碱蓬促分裂原活化蛋白激酶激酶(SsMAPKK)的表达

摘要

第一部分我们以盐生植物中亚滨藜(AtriplexcentralasiaticaIljin)为材料,用PT-PCR方法克隆了BADH cDNA.该基因全长1530bp,编码500个氨基酸的蛋白质.Northern blotting杂交结果表明,BADH具有组成型表达的特性. 100 uMABA和400mM NaCl处理48小时后,BADH的表达增加10倍左右.说明中亚滨藜BADH的表达受到胁迫诱导,该基因的上游序列在基因诱导表达中可能起到重要的作用.为了得到BADH基因的上游序列,我们以 Lambda EMBL3/BamH 1为载体,构建了盐生植物中亚滨藜的基因组文库.该文库包含约1.3×l0<'6>个重组噬菌体,插入片段大小约为18kb,含插入片段的频率为100﹪.第二部分我们以盐生植物碱蓬为材料,分离到参与MAP激酶信号途径的一个新成员,MAP激酶激酶(SsMAPKK).该基因读码框长1572bp,编码含524个氨基酸的蛋白质.它与拟南芥ATMKK3和烟草NPK2同源性较高.Northernblotting表明,低温、干旱和高盐处理24小时,茎中SsMAPKK的表达明显提高;延长到36小时,表达量进一步提高;ABA不诱导SsMAPKK的表达.Southernblotting分析表明,在碱蓬的基因组中SsMAPKK至少有两个拷贝