烧伤大鼠创面成纤维细胞硫化氢/胱硫醚-γ-裂解酶体系变化的研究

摘要

目的：烧伤大鼠创面成纤维细胞硫化氢/胱硫醚-γ-裂解酶体系变化的研究。
　　方法：取大鼠烧伤创面成纤维细胞为研究对象，将78只健康SD大鼠随机分为13组（正常对照组、生理盐水组3d、7d、14d，NaHS组3d、7d、14d，PPG组3d、7d、14d，NaHS+PPG组3d、7d、14d），正常对照组不作任何干预，其余各组大鼠均人为制造5％深Ⅱ度烧伤创面并取病理切片证实，空白对照组每天定时腹腔注射生理盐水，NaHS组每天定时腹腔注射NaHS溶液，PPG组每天定时腹腔注射炔丙基甘氨酸，NaHS+PPG组每天定时腹腔注射NaHS+炔丙基甘氨酸，伤后第3、7、14天分离烧伤大鼠创面成纤维细胞体外培养，测定细胞培养上清液中硫化氢的浓度、成纤维细胞中CSEmRNA基因相对表达水平和CSE蛋白相对表达量。
　　结果：在不同时相，测得各组硫化氢的浓度，生理盐水组（NS3、NS7、NS14）与正常组对照均有明显差异（P＜0.05）；NaHS组（N3、N7、N14）与生理盐水组（NS3、NS7、NS14）均有明显差异（P＜0.05）；在同一时间点，PPG组（P3、P7、P14）与生理盐水组（NS3、NS7、NS14）均无明显差异（P＞0.05）；NaHS组（N3、N7、N14）与NaHS+PPG组（N＋P3、N＋P7、N＋P14）均有明显差异（P＜0.05）；PPG组（P3、P7、P14）与NaHS+PPG组（N＋P3、N＋P7、N＋P14）均无明显差异（P＞0.05）；细胞内CSEmRNA变化情况:生理盐水组(NS3、NS7）与正常组比较差异有统计学意义（P＜0.05），生理盐水组 NS14与正常组比较差异无显著性（P＞0.05）；NaHS组（N3、N7、N14）与生理盐水组（NS3、NS7、NS14）对比差异均有统计学意义（P＜0.05）；PPG组（P3、P7）与生理盐水组（NS3、NS7）比较差异均有统计学意义（P＜0.05），PPG组P14与生理盐水组NS14比较差异无统计学意义（P＞0.05）；在同一时间点，NaHS组（N3、N7、N14）与NaHS+PPG组（N＋P3、N＋P7、N＋P14）差异均有统计学意义（P＜0.05）；PPG组P3与NaHS+PPG组N＋P3比较差异有统计学意义（P＜0.05），PGG组（P7、P14）与NaHS+PPG组（N＋P7、N＋P14）比较差异均无统计学意义（P＞0.05）；H2S分泌过程中CSE蛋白合成情况，生理盐水组（NS3、NS7、NS14）与正常组对照组对比差异均有统计学意义（P＜0.05）；在同一时间点， NaHS组（N3、N7、N14）与生理盐水组（NS3、NS7、NS14）对比差异均有统计学意义（P＜0.05）；PPG组（P3、P14）与生理盐水组（NS3、NS14）比较均无明显差异（P＞0.05），PPG组P7与生理盐水组NS7比较有统计学差异（P＜0.05）；NaHS组N3与NaHS+PPG组N＋P3比较无统计学差异（P＜0.05），NaHS组（N7、N14）与NaHS+PPG组（N＋P7、N＋P14）比较均有统计学差异（P＜0.05），NaHS组（N3）与NaHS+PPG组（N＋P3）比较无统计学差异（P＞0.05）；PPG组（P3、P7）与NaHS+PPG组（N＋P3、N＋P7）比较均有统计学差异（P＜0.05），PPG组（P14）与NaHS+PPG组（N＋P14）比较无统计学差异（P＞0.05）。
　　结论：烧伤后大鼠创面成纤维细胞硫化氢/胱硫醚-γ-裂解酶体系功能降低。外源性硫化氢对成纤维细胞硫化氢/胱硫醚-γ-裂解酶体系具有促进作用。PPG通过抑制成纤维细胞内硫化氢/胱硫醚-γ-裂解酶体系的功能，抑制内源性H2S的生成。

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第一章 引言

（一）硫化氢的相关应用研究

（二）成纤维细胞在创面修复中的作用

（三）选题依据、研究内容和目标及论文结构

第二章 材料与方法

2.1 实验条件

2.2 主要仪器

2.3主要试剂

2.4主要溶液配置

2.5 操作步骤

2.51实验分组及药物浓度梯度

2.5细胞培养

2.53总RNA抽提步骤：

2.54 Western blot步骤：

2.6 统计学分析

第三章 结果

第四章 讨论

第五章 结论

参考文献

致谢

第六章 附录

6.1 技术路线图

6.2英文缩略词

6.3试验图片

综述:硫化氢硫化氢在各学科的研究基础及进展

作者介绍