慢性高原病大鼠模型FPN、HJV及TMPRSS6水平变化的研究

摘要

目的：本课题通过制备 CMS大鼠模型，探讨 CMS大鼠模型 FPN、TMPRSS6及HJV的变化，为揭示CMS铁代谢相关因子的改变，丰富CMS铁代谢的研究内容。
　　方法：选取雄性SD大鼠50只，随机分成常氧组和低氧组，常氧组于西宁地区分别饲养（海拔2260m）7d、15d、30d，各8只大鼠；低氧组于低压氧舱（模拟海拔5000m）分别饲养7d、15d、30d，低氧7d8只大鼠，低氧15d、30d各9只大鼠。分别于饲养7d、15d、30d测定大鼠外周血血常规，qRT-PCR法测定大鼠肝脏FPN、肝脏mHJV、肝脏TMPRSS6、肌肉sHJV mRNA表达水平，Western blotting法定肝脏mHJV、肝脏TMPRSS6、肌肉sHJV蛋白水平，IHC法测大鼠肝脏FPN蛋白水平。
　　结果：(1)大鼠肝脏FPN mRNA表达水平，低氧7d、低氧15d、低氧30d均高于各常氧对照组(均P＜0.01)；低氧组内比较低氧15d、低氧30d均高于低氧7d(均P＜0.01)。(2)大鼠肝脏FPN蛋白水平，低氧7d和低氧30d均高于各常氧对照组(均P＜0.01)，低氧15d高于常氧15d(P＜0.05)；低氧组内比较低氧15d、低氧30d均高于同组7d(均P＜0.01)，低氧30d高于同组15d（P＜0.05）。(3)大鼠肝脏mHJV mRNA表达水平，低氧15d、低氧30d均低于各自常氧对照组(均P＜0.01)；低氧组内比较低氧15d、低氧30d均低于低氧7d(P＜0.05及 P＜0.01)，低氧30d低于低氧15d(P＜0.05)。(4)大鼠肌肉sHJV mRNA表达水平，低氧7d、低氧15d、低氧30d均高于各自常氧对照组(均P＜0.01)。(5)大鼠肝脏TMPRSS6 mRNA表达水平，低氧7d、15d、30d均高于各自常氧对照组(均P＜0.01)；低氧组内比较低氧30d高于低氧7d及15d(均P＜0.01)。(6)大鼠肝脏mHJV蛋白表达水平，低氧7d、15d、30d比各常氧对照组降低(均P＜0.01)，随缺氧时间延长mHJV含量逐渐降低。(7)大鼠肌肉sHJV蛋白表达水平，低氧7d、15d、30d较常氧对照组升高（P＜0.05），且随着缺氧时间延长 sHJV表达逐渐增加。(8)大鼠肝脏TMPRSS6蛋白表达水平，低氧7d、15d、30d比各常氧对照组升高(均P＜0.01)，随缺氧时间延长TMPRSS6表达逐渐升高。
　　结论:在高原低压低氧条件下，FPN、sHJV、TMPRSS6 mRNA和蛋白表达水平增加，并随缺氧时间延长逐渐增加，mHJV mRNA和蛋白表达水平减低，并随缺氧时间延长逐渐降低。FPN、mHJV、sHJV、TMPRSS6参与CMS铁代谢的调节，可能是CMS铁代谢调节的重要靶点。

目录

声明

主要符号对照表

第1章 引言

第2章 材料与方法

2.1 材料

2.1.1 实验动物

2.1.2 主要试剂

2.1.3 主要仪器设备

2.1.4 主要分析软件

2.2 方法

2.2.1 技术路线

2.2.2 引物设计与合成

2.2.3 动物模型制备及动物分组

2.2.4 标本收集

2.2.5 组织总RNA提取测定及cDNA合成

2.2.6 大鼠肝脏FPN、mHJV、TMPRSS6及肌肉sHJV mRNA表达的测定

2.2.7 大鼠肝脏FPN蛋白含量的测定

2.2.8 大鼠肝脏m-HJV、TMPRSS6及肌肉s-HJV蛋白含量的测定

2.2.9 统计学方法

第3章 实验结果

3.1 大鼠一般资料

3.2 大鼠肝脏FPN、mHJV、TMPRSS6及肌肉sHJV mRNA表达水平

3.2.1 大鼠肝脏/肌肉组织总RNA提取

3.2.2 大鼠肝脏组织FPN、HJV、TMPRSS6和肌肉sHJV mRNA水平测定

3.3 大鼠肝脏FPN蛋白水平

3.3.1 大鼠肝脏FPN的表达结果

3.3.2 大鼠肝脏组织FPN蛋白积分结果

3.3.3 大鼠肝脏组织FPN蛋白构成比结果

3.4 大鼠肝脏mHJV、TMPRSS6及肌肉sHJV 蛋白含量

第4章 讨论

第5章 结论

参考文献

致谢

附录A 文献综述:铁调素调节蛋白的研究进展

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