医源性胆管狭窄与肌成纤维细胞的相关性研究

摘要

背景与目的:
　　 医源性胆管损伤的远期并发症的常见原因是医源性胆管狭窄，如果处理不当，不及时，造成反复发作性胆管炎，最终形成胆汁性肝硬变，门静脉高压症，有较高的死亡率和病死率，预后差。医源性胆管狭窄的处理是目前胆道外科的一大难题，术后突出表现为胆道瘢痕性挛缩和管腔狭窄，尤以肝门部或肝门部以上胆管狭窄最为常见。因此，为了阐明医源性胆管狭窄的形成机制，探讨肌成纤维细胞(myofibroblast,MFB)在医源性胆管狭窄形成过程中的作用，我们通过建立家兔肝外胆管损伤修复模型，术后动态观察肌成纤维细胞在胆道愈合过程中的表达。
　　 材料与方法：
　　 选取健康家兔24只，雌雄不限，平均体重2.0～2.5kg。通过建立家兔肝外胆管损伤修复模型，分别于术后1周、3周、3个月、6个月取材行显微镜观察、电镜观察和a–平滑肌肌动蛋白(a–SMA)免疫组织化学染色观察。
　　 结果:
　　 1.一期术后10天1只家兔死于胆瘘，2只家兔于术后1～2月死于梗阻性黄疸，共存活24只；术后早期食欲、活动、反应尚正常，远期观察6只家兔3月以上时出现食欲下降、体重减轻、小便色深及陶土便等梗阻性黄疸表现；术后腹腔引流管平均引流5～10ml淡血性液体，混有少量胆汁。
　　 2．显微镜观察：术后1周时，Masson染色及Verhoeff染色见新生的胶原纤维排列紊乱；术后3周时，Masson染色及Verhoeff染色见粘膜下大量胶原纤维增生；3月及6月时，Masson染色及Verhoeff染色见胶原纤维排列较前整齐，但仍杂乱无序、致密。
　　 3.透射电镜观察：MFB功能活跃，持续存在于整个胆道愈合过程；其中3月时瘢痕组织细胞功能仍较活跃，MFB数量达到最多。
　　 4.免疫组织化学染色观察：a-SMA表达于肌成纤维细胞胞浆，术后1周至6个月表达均较强，与正常对照比较差异有显著性(p<0.01),术后各期表达差异无显著性(p>0.05)。
　　 结论:
　　 1.免疫组织化学结果证实了a-SMA是引起胆道瘢痕性挛缩，造成术后胆道狭窄的重要原因。
　　 2.MFB功能活跃，持续存在，是导致胆道瘢痕性挛缩和管腔狭窄的主要原因。