猪BMP11基因的克隆、表达分析及染色体定位

摘要

国外品种长白猪和中国的地方品种里岔黑猪以猪身长著称。从分子水平上研究猪BMP11的结构和功能，从遗传上增加猪的体长，改善猪的经济性状具有重要理论意义和实践价值。本研究首先对猪BMP11进行了克隆，然后分析了其在猪体内各组织中的表达情况，最后进行了染色体定位。根据GenBank上登录的人和小鼠等物种的BMP11序列设计简并引物，采用RT-PCR和以基因组DNA为模板的PCR方法，分别从猪胚脑组织和猪基因组DNA中克隆得到猪BMP11的外显子2和内含子2序列。通过5’-RACE的方法获得了部分外显子1序列。在该基因的表达方面，对不同时期猪胚和仔猪各组织mRNA的表达进行了分析。

目录

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缩略词表

第一章.文献综述

1.1 TGF-β超家族及其信号转导

1.1.1 TGV-β超家族的结构特征

1.1.2 TGF-β受体及信号传递

1.1.3 TGF-β作用方式及调控

1.1.4 TGV-β生物学效应

1.1.5 TGF-β超家族成员的细胞内信号转导

1.2骨形态发生蛋白11基因(BMP11)的研究现状

1.2.1 BMP11的发现、结构、同源性分析及染色体定位

1.2.2 BMP11的功能研究

1.2.3 BMP11的负调控作用

1.2.4 BMP11在胚体内的表达情况

1.2.5 BMP11的信号传导通路

1.3猪基因图谱研究进展

第二章 本研究的目的意义

第三章 材料与方法

3.1材料

3.1.1菌株

3.1.2实验材料

3.1.3主要试剂及来源

3.1.4主要仪器设备

3.1.5辐射杂种板

3.1.6主要分子生物学数据库及软件

3.2实验方法

3.2.1培养基、缓冲液与常用试剂的配制

3.2.2总RNA的提取

3.2.3基因组DNA的提取

3.2.4引物设计

3.2.5猪BMP11序列的克隆

3.2.6 5’-RACE技术

3.2.7扩增产物的纯化、克隆、鉴定和测序

3.2.8 DNA序列同源性检索鉴定

3.2.9猪BMP11的组织表达谱研究

3.2.10基因物理定位的RH方法

第六章 结果与分析

4.1总RNA的提取与检测

4.2猪BMP11的克隆及分析

4.2.1外显子2的克隆及同源性比较

4.2.2 BMP11的5’端克隆及同源性比较

4.2.3内含子2的克隆

4.2.4猪BMP11同人、小鼠和大鼠的同源性比较

4.3猪BMP11的组织表达谱分析

4.4猪BMP11的染色体精细定位

第五章 讨论

5.1总RNA提取及5'-RACE

5.2 BMP11的鉴定和序列分析

5.3 BMP11的组织表达分析

5.4 BMP11的物理定位

5.4.1定位引物的设计

5.4.2 BMP11的物理定位

第六章 小结

参考文献

致谢

在读期间发表论文题录

附录