新城疫病毒和传染性支气管炎病毒核酸疫苗的研究

摘要

新城疫(ND)和传染性支气管炎(IB)一直是危害我国养禽业的两大重要病毒性传染病。虽然预防这两种疫病的弱毒疫苗早已研制成功并得到广泛应用，但是由于受母源抗体等因素的干扰，常常发生免疫失败。为了探索一种能够不受母源抗体干扰，可在1日龄进行基础免疫接种、缩短或消除雏鸡免疫空白期的新型疫苗，用于预防ND和IB，以保障养鸡业的健康发展，本论文进行了有关NDV和IBV核酸疫苗的研究。为了研究NDV核酸疫苗的免疫功效，本论文首先通过PCR方法自含NDV Z株F基因的阳性质粒中扩增了F基因，然后将其插入到真核表达载体pcDNA3.1/V5-His-TOPO中，阳性克隆经PCR扩增和核酸内切酶酶切鉴定准确无误，核酸序列测定结果与原始基因比较，同源性＞99﹪，启始密码子和终止密码子未出现变异，将该重组质粒命名为pcDNANDVZF。将pcDNANDVZF在脂质体作用下转染CEF细胞，用间接免疫荧光试验(IFA)检测，结果证明pcDNANDVZF可在CEF细胞中大量表达F蛋白。将poDNANDVZF(即NDV核酸疫苗)采用肌注法以不同的剂量分别免疫小鼠、1日龄SPF雏鸡和1日龄商品代雏鸡，进行动物免疫和攻毒保护试验，结果表明NDV核酸疫苗具有良好的免疫效果。

目录

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缩略词

引言

第一部分新城疫病毒核酸疫苗的研究

试验一新城疫病毒核酸疫苗的构建及其真核表达

试验二新城疫病毒核酸疫苗在动物体内免疫功效的鉴定

试验三新城疫病毒核酸疫苗在1日龄商品代雏鸡体内免疫功效的鉴定

第二部分传染性支气管炎病毒核酸疫苗的研究

试验四传染性支气管炎病毒核酸疫苗的构建及其真核表达

试验五传染性支气管炎病毒核酸疫苗在动物体内免疫功效的鉴定

试验六传染性支气管炎病毒核酸疫苗在1日龄商品代雏鸡体内免疫功效的鉴定

第三部分胸腺素免疫活性的检测

试验七几种实验室不同提取胸腺素方法的比较

试验八鸡胸腺素免疫活性的比较

第四部分结论

参考文献

就读硕士期间发表的主要论文

致谢

附录