大蒜未受精子房离体培养的研究

摘要

试验选取六个不同基因型的大蒜品种，分别进行大蒜花器官的培养，获得发育良好的大蒜子房。以大蒜未受精子房为试材，在适宜的培养条件下完成了愈伤组织的诱导及分化，获得了再生植株，建立了大蒜单倍体植株再生体系。此外还研究了大蒜未受精子房诱导愈伤组织的影响因素，进一步优化了大蒜子房培养技术体系。结果表明:
　　 1、大蒜子房愈伤组织诱导及分化需要适宜的培养基条件。以‘糙蒜'品种的未受精子房为试材进行离体培养，B5培养基及MS培养基上均能形成愈伤组织，B5培养基效果优于MS培养基;N6培养基不能诱导形成愈伤组织，不宜用于大蒜子房愈伤组织的诱导。诱导大蒜子房愈伤组织的适宜激素组合为2mg·L-16-BA+1mg·L-1 NAA，愈伤组织诱导率可达11.11％。在B5培养基上添加3mg·L-16-BA+1mg·L-1 NAA，不定芽的分化频率最高，可达46.15％。诱导生根的最佳培养基为B5+0.05mg·L-1 NAA。
　　 2、低温预处理和短期热激处理均可提高大蒜子房愈伤组织的诱导率。以‘糙蒜'和‘正月早'开花前1～2d的未受精子房为试材，进行分别0(CK)、1、2、4、6d的4℃低温预处理和35℃0(CK)、12、24、36、48h的热激处理，发现4℃低温处理4d可明显提高愈伤组织的诱导率，35℃处理48h可显著提高诱导率。但经过热激处理的子房不论处理时间长短，褐化均较为严重，褐化率都在60％以上，不宜采用。
　　 3、基因型不同，子房愈伤组织的诱导情况不同。分别以‘糙蒜'、‘二水早'、‘蒲棵'、‘正月早'、‘红七星'六个不同品种的开花前1～2d的大蒜未受精子房为试材，发现糙蒜品种的子房愈伤组织诱导率最高，为11.11％;其次为‘正月早'、‘蒲棵'、‘红七星'、‘二季早'，‘二水早'的子房愈伤组织诱导率最低为0。
　　 4、子房发育程度对愈伤组织诱导有一定的影响。以‘糙蒜'、‘蒲棵'、‘正月早'三个品种的子房为试材，分别对开花当天、开花前2～3d、开花前6～7d的大蒜子房进行培养，发现三个品种均以开花当天的子房愈伤组织诱导率最高，诱导率分别为13.82％、8.00％和13.25％。
　　 5、以正常二倍体大蒜叶片为对照，利用流式细胞仪对再生植株进行倍性鉴定。研究发现，‘糙蒜'品种由愈伤组织诱导分化而成的16株再生植株中，14株为单倍体，其余2株为二倍体;由雌核发育胚途径产生的2株再生植株为单倍体。

目录

声明

符号说明

摘要

1 前言

1．1 大蒜育种的研究进展

1．1．1 无性选育

1．1．2 有性育种

1．1．3 单倍体育种

1．1．4 多倍体育种

1．1．5 体细胞杂交和转基因育种

1．1．6 大蒜脱毒技术

1．2 蔬菜未受精子房离体培养的研究进展

1．2．1 蔬菜未受精子房或胚珠培养研究现状

1．2．2 影响未授粉子房离体培养的因素

1．3 植物倍性的鉴定方法

1．4 本研究的目的及意义

2 材料与方法

2．1 试验材料

2．2 试验设计与研究方法

2．2．1 大蒜花器官的培养

2．2．2 大蒜子房单倍体再生体系的建立

2．2．3 不同因素对大蒜子房愈伤组织诱导的影响

2．2．4 数据统计

2．3 再生植株的倍性鉴定

3 结果与分析

3．1 大蒜花器官的发育变化

3．2 不同因素对大蒜子房愈伤组织诱导的影响

3．2．1 培养基对大蒜子房愈伤组织诱导的影响

3．2．2 基因型对大蒜子房愈伤组织诱导的影响

3．2．3 外植体发育程度对大蒜子房愈伤组织诱导的影响

3．2．4 低温预处理对大蒜子房愈伤组织诱导的影响

3．2．5 短期热激处理对大蒜子房愈伤组织诱导的影响

3．3 愈伤组织的出芽诱导

3．4 不定芽的生根诱导

3．5 再生植株倍性的鉴定

4 讨论

4．1 大蒜花器官的培养

4．2 大蒜单倍体再生体系的建立

4．2．1 培养条件对大蒜子房单倍体诱导的影响

4．2．2 激素种类和浓度对子房单倍体诱导的影响

4．3 不同因素对大蒜子房愈伤组织诱导的影响

4．3．1 基因型的影响

4．3．2 子房发育程度对愈伤组织诱导的影响

4．3．3 温度对愈伤组织诱导的影响

4．4 再生植株的倍性鉴定

5 结论

参考文献

附录

致谢

硕士期间发表与完成论文情况