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PN0胃癌区域淋巴结微转移的基因研究

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前言

(一)普通病理学检查

(二)免疫组织化学法检测

(三)分子生物学检测技术

材料与方法

1.临床资料选取

2. 基本原理

3. 主要设备

4.主要试剂

5.RNA的提取

6. 逆转录聚合酶链反应

7. RT-PCR扩增产物检测分析

结果

讨论

结论

参考文献

·综述·

1 胃癌淋巴结微转移的定义及诊断方法

3 胃癌微转移对手术的指导意义

4 胃癌微转移与临床病理分期及预后

综述参考文献

致谢

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摘要

目的:对PN0胃癌区域淋巴结的微转移进行CK19mRNA基因研究,证实常规病理检查(HE染色)结果全部阴性的胃癌淋巴结(pN0)存在微转移,分析微转移与胃癌临床病理学的相关性,探讨PN0胃癌的淋巴清扫范围。
  方法:筛选2011年10月至2013年6月期间于宁夏自治区人民医院胃肠外科行胃癌根治术患者20例,其区域淋巴结转移经常规病理检查确认全部为阴性,收集每例术后患者一般3-6个,共99个淋巴结蜡块,淋巴结分别取自第1、2站,将所取标本逐一登记。癌组织标本经术后常规病理学检查均得到确认。另从5例非肿瘤患者取19个淋巴结作为阴性对照,其中包括胃溃疡、十二指肠穿孔各两例,以及一例幽门管狭窄患者。采用RT-PCR法检测其CK19mRNA的表达情况,确定PN0胃癌区域淋巴结有无微转移。
  结果:在所有的20例胃癌患者中,第1、2站淋巴结99个,经RT-PCR扩增CK19mRNA检测后,总共有5例患者(25%)共计21个淋巴结(21.2%)检测阳性,表明这5例PN0胃癌患者中共21个淋巴结存在微转移,由RT-PCR扩增K19mRNA检测PN0胃癌淋巴结微转移的检出率为21.2%。PN0胃癌淋巴结微转移的存在与肿瘤侵及深度有关(P<0.05),与患者的年龄、性别、肿瘤的大小、肿瘤的分化程度以及部位无关(P>0.05)。
  结论:PN0胃癌淋巴结存在微转移,RT-PCR扩增K19mRNA检测PN0胃癌区域淋巴结微转移检出率高,是一种高度敏感,特异性好的检测方法,可以用来诊断PN0胃癌淋巴结的微转移。结合淋巴结微转移情况,可对早期胃癌患者进行更加精确的分期,指导术中淋巴清扫范围,从而制定更合理的治疗方案。

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