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TGF-β1和CTGF在不同退变程度的腰椎间盘组织中的表达及意义

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前言

材料与方法

1.实验试剂与仪器

1.1主要实验试剂

1.2主要溶液配制方法

1.3 主要仪器与设备

2.研究对象:

3. 实验步骤与方法

3.1标本处理与保存

3.2实验步骤

4.数据检测及统计处理

结果

1. 镜下组织观察:

2. We s te rn-blot检测腰椎间盘组织中TGF-β1和CTGF的表达

讨论

结论

参考文献

附图

综述

综述参考文献

致谢

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个 人 简 历

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摘要

目的:通过检测不同退变程度腰椎间盘组织中转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)和结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)的表达,探寻上述两种蛋白在人类椎间盘退变发生发展中的作用。
  方法:选取2012年11月——2013年4月间手术摘除的33例腰椎间盘突出症患者和12例腰椎骨折患者的腰椎间盘做为实验样本,组织切片用HE染色,镜下观察间盘组织的退变情况,并根据病理学改变将试验样本进行分级分组;再用Western-blot法测定各组样本中TGF-β1和CTGF的表达量。
  结果:根据实验样本的病理学改变,将所有样本分为:正常间盘10例(全部来自腰椎骨折患者),轻度退变10例(2例来自腰椎骨折患者,8例来自腰椎间盘突出症患者),中度退变9例(全部来自腰椎间盘突出症患者),重度退变16例(全部来自腰椎间盘突出症患者)。组织学观察见正常的椎间盘组织的软骨样基质中分布大小一致的圆形髓核细胞,细胞间质均匀一致,未见胶原纤维增生;轻度退变间盘髓核细胞轻度变大,髓核细胞数目未见明显减少,基质内有少量炎细胞浸润,间质胶原纤维未见明显增生;中度退变间盘髓核细胞大多数变大,呈空泡样,正常髓核细胞数目减少,间质内胶原纤维轻度增生,可见小血管长入,炎细胞浸润。重度退变间盘基质内未见正常的髓核细胞,间质内胶原纤维重度增生伴纤维化。蛋白定量分析:正常间盘组织中TGF-β1和CTGF有微量表达,退变间盘组织中上述两种因子表达量明显增高(P<0.05),并且随着腰椎间盘退变程度的加重,两种因子的表达含量也随之增高,组间比较,有差异性。
  结论:人类腰椎间盘组织中TGF-β1和CTGF的表达含量与腰椎间盘退变的进展程度密切相关,两种蛋白因子表达增高对促进腰椎间盘的退变可能发挥重要作用。

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