植物乳杆菌-松花粉多糖微胶囊的制备及其对獭兔生长性能和免疫功能的影响

摘要

近年来，微生态制剂在生产中已被广泛应用。植物乳杆菌是动物肠道中的正常菌群，也是一种重要的乳酸菌，具有较好的肠道粘附能力，能产生乳酸及一些抗菌物质，调节动物消化道微生物区系平衡，抑制肠道腐败菌、致病菌的繁殖，促进营养物质消化吸收，增强机体免疫力。然而益生菌益生作用的发挥与其数量密切相关，其数量对维持肠道健康环境和提高机体免疫功能起着关键作用。目前，口服途径由于安全性高且成本低，是饲用益生菌的理想手段。然而，由于胃酸对益生菌的破坏作用，益生菌的活菌数在此过程中会大幅度下降，难以有足够数量的活菌到达肠道或定植肠道而发挥作用。微胶囊技术可显著增强菌体对外界不利环境的耐受力，大大提高菌体进入肠道内的存活率。
　　近年来已有研究证实益生菌和植物多糖之间存在共生关系。一些植物多糖不仅能够明显促进双歧杆菌、嗜酸乳杆菌的增殖，而且还能抑制沙门氏菌的生长。本实验室已经证实泰山松花粉多糖（TPPPS）是一种有效的免疫增强剂和免疫佐剂，但是益生菌和TPPPS之间是否具有协同益生效应尚不清楚。TPPPS作为一种水溶性多糖，容易受到胃酸和酶的破坏，影响其稳定性及限制加工应用。因此，为了保护益生菌的活性以及TPPPS的结构和功能，探索TPPPS和植物乳杆菌是否具有协同效应，本试验以植物乳杆菌和TPPPS为芯材，海藻酸钠和壳聚糖为壁材，制备植物乳杆菌-TPPPS微胶囊，并通过正交试验对包埋工艺进行优化，旨在得到制备植物乳杆菌-TPPPS微胶囊的最佳工艺条件。本试验筛选出制备微胶囊的最佳条件，即水相与油相体积比为1︰3，CaCO3与海藻酸钠的质量比为1︰4，CaCO3与冰醋酸的物质的量比为1︰:4，壳聚糖浓度为4 g/L。在此条件下研制的植物乳杆菌-TPPPS微胶囊平均粒径为125.4μm，呈球性好且表面光滑。微胶囊化后的植物乳杆菌通过模拟的胃肠道环境后存活率可达62.36％，说明微胶囊能够较好的抵制胃酸环境，降低酸性胃液对益生菌的破坏，提高益生菌在肠液中存活的数量。
　　选取体重相近的SPF獭兔48只，随机分为4组。I-IV组獭兔每天分别口服饲喂1 mL植物乳杆菌、植物乳杆菌+0.5%TPPPS、微胶囊、PBS。在饲喂后7、14、21、28、35、42 d每组随机选取3只兔子采血检测血清中兔瘟抗体水平，溶菌酶水平，IFN-γ水平。在0、14、28、42 d每组随机选取3只解剖无菌采集回肠、盲肠组织检测肠组织中乳酸菌和大肠杆菌的定植情况；采集小肠组织分析肠绒毛发育状况。结果显示微胶囊可以提高獭兔的日增重，改善肠道微生物环境，促进肠绒毛的发育，提高抗体、溶菌酶、IFN-γ的水平，并且效果显著优于植物乳杆菌单独使用。此外，未经微胶囊化的植物乳杆菌联合TPPPS的效果也明显优于植物乳杆菌。
　　以上试验结果表明植物乳杆菌和TPPPS在促进獭兔生长性能和免疫功能方面具有协同作用，并且将二者微胶囊化后效果最为显著。这为植物乳杆菌和TPPPS在哺乳动物上的开发和利用提供了科学的依据，具有重要的理论和实践意义。

目录

声明

符 号 说 明

1. 前言

1.1益生菌的研究进展

1.2植物多糖的研究进展

1. 3 泰山松花粉多糖的研究

1.4 微胶囊简介

1.5 本研究的目的和意义

2 材料和方法

2.1 菌株与实验动物

2.2 试剂和仪器

2.3 海藻酸钠/壳聚糖微胶囊的制备

2.4 微胶囊对獭兔生长性能和免疫功能的影响

2.5 数据分析

3. 结果与分析

3.1植物乳杆菌-松花粉多糖微胶囊的制备

3.2微胶囊对獭兔生长性能和免疫功能的影响

4 讨论

5结论

参考文献

硕士期间发表的论文

致谢

个人简介