复方蜥蜴散不同微粒组合剂干预胃癌前病变模型大鼠Survivin、Bcl-2及P53的表达和相关性研究

摘要

目的：研究复方蜥蜴散不同微粒组合剂对胃癌前病变模型大鼠 Survivin、Bcl-2及 P53表达的影响，探讨该制剂治疗胃癌前病变可能的作用机制，为临床应用该制剂治疗胃癌前病变提供实验依据。
　　方法：将120只 SPF级4-6周龄 SD雄性大鼠自购进适应性喂养1周后，随机抽取20只作为正常对照组，不作任何处理，其余100只采用0.02mol/L的 N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍（MNNG）溶液5mL/kg灌胃、饥饱失常（2d饱食，ld饥饿）和情绪刺激（每周夹尾1次，持续10min）综合造模制备胃癌前病变大鼠模型，8周后随机抽取1只正常对照组大鼠和5只造模大鼠，杀检证明符合胃癌前病变病理诊断标准，造模过程中共死亡27只，然后随机抽取65只分为模型对照组（0.9﹪氯化钠溶液10mL·kg-1·d-1灌胃）、复方蜥蜴散80目组、100目组、80目100目等量混合组（XY80组、XY100组、XY80′100组均为1.5g·kg-1·d-1糊剂混悬液灌胃）、维酶素组（0.3g·kg-1·d-1维酶素混悬液灌胃）共5组，每组13只，均连续用药12周，观察各组大鼠一般情况，在给药第12周末，将各组大鼠禁食禁水24h，麻醉并处死后肉眼观察胃黏膜病理组织学改变，HE染色做病理组织学观察，邻近切片做免疫组织化学染色，检测其对胃黏膜组织凋亡抑制基因 Survivin、Bcl-2和凋亡促进基因 P53表达的影响。
　　结果：
　　1.一般情况：造模成功率73﹪，模型对照组死亡4只，维酶素组和XY80组各死亡1只。正常对照组体形肥胖，被毛清洁有光泽，活动灵敏，进食进水量良好，大便呈颗粒状，尾色红润；模型对照组形体消瘦，被毛蓬松、枯黄无光泽，活动少而迟钝，进食进水量减少，软便时不成形，尾色淡白；各治疗组上述表现均有不同程度改善。治疗前后各组大鼠平均体重：正常对照组（565.54士51.70/638.15士42.68）、模型对照组（456.23士35.12/537.22士22.92）、XY80组（456.54士41.32/587.08士30.10）、XY100组（455.08士38.56/587.54士29.63）、XY80′100组（457.54士43.03/620.15士43.44）、维酶素组（453.31士34.07/577.17士46.24），统计学处理结果显示，治疗前，各组与正常对照组同期比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；治疗后，各治疗组与模型对照组同期比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；XY80′100组与维酶素组同期比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；XY80组、XY100组与 XY80′100组同期比较，差异有统计学意义（P＜0.05），以XY80′100组体重值为最高。
　　2.病理组织学观察：病理形态学肉眼观察可见正常对照组胃黏膜呈粉红色，黏膜皱襞表面光滑规整，胃壁较厚，伸展性好，被覆较多黏液；模型对照组胃黏膜颜色多呈苍白或灰白色，黏膜皱襞紊乱，表面缺少光泽，部分区域皱襞变浅或消失，胃壁弹力减弱，无黏液，外观有出血点及颗粒样结节，黏膜下可透见树枝状血管；各治疗组上述表现均有不同程度改善，以XY80′100组为最佳。切片行 HE染色后，镜下观察可见：正常对照组胃黏膜结构正常；模型对照组胃黏膜不同程度萎缩；各治疗组胃黏膜肠化、异型增生均有不同程度改善，以XY80′100组为最佳。
　　3.免疫组化结果：各组大鼠胃黏膜组织 Survivin、Bcl-2及 P53的平均吸光度（A）：正常对照组（21.46士2.69/19.06士2.32/19.14士2.45）、模型对照组（29.29士3.51/30.20士4.83/30.16士4.82）、XY80组（24.18士2.82/22.14士3.57/22.23士3.63）、XY100组（24.05士2.80/21.98士3.06/22.16士3.21）、XY80′100组（21.63士2.61/19.15士2.67/19.35士3.24）、维酶素组（26.59士3.36/24.80士2.89/25.11士3.34），统计学处理结果显示，各组与正常对照组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；各治疗组与模型对照组比较，A值均明显降低，差异有统计学意义（P＜0.05）；XY各治疗组与维酶素组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；XY80组、XY100组与 XY80′100组比较，差异有统计学意义（P＜0.05），以XY80′100组 A值最低。
　　4.相关分析结果：经 Pearson相关分析，Survivin与 Bcl-2表达呈正相关（P＜0.05，相关系数 r=0.935）；Survivin与 P53表达呈正相关（P＜0.05，相关系数 r=0.899）。
　　结论：
　　1.复方蜥蜴散不同微粒组合剂可以整体改善胃癌前病变模型大鼠毛色、精神状态、进食进水量、大便、体重变化、活动及存活情况。
　　2.复方蜥蜴散不同微粒组合剂可以改善胃癌前病变模型大鼠胃黏膜腺体萎缩、肠上皮化生及异型增生情况。
　　3.复方蜥蜴散不同微粒组合剂可以降低凋亡抑制基因 Survivin、Bcl-2和凋亡促进基因 P53的表达。
　　4.Survivin与 Bcl-2、P53呈正相关，说明 Survivin、Bcl-2和P53在胃癌前病变的发生发展过程中具有协同作用。
　　5.复方蜥蜴散不同微粒组合剂不仅配方独特，而且采用80目和100目等量混合和糊剂给药方式可进一步逆转胃癌前病变，其机制可能是通过下调凋亡抑制基因 Survivin和Bcl-2的表达，降低凋亡促进基因 P53的突变，从而实现有效干预胃癌前病变和延缓癌变进程的作用。

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前言

材料与方法

1.材料

2.方法

结果

1.一般情况

2.病理组织学观察

3.免疫组化结果

4.相关分析结果

讨论

1.Survivin、Bcl-2及 P53与胃癌前病变的关系

2.胃癌前病变大鼠模型的制备

3.复方蜥蜴散不同微粒组合剂理论依据与组方原则

4.复方蜥蜴散不同微粒组合剂的现代药理研究

5.复方蜥蜴散不同微粒组合剂对胃癌前病变模型大鼠 Survivin、Bcl-2 及 P53的影响

结论

附图

参考文献

文献综述

1.Survivin、Bcl-2及 P53在胃良恶性病变中表达的研究进展

2.胃癌前病变动物模型的研究进展

3.祖国医学对胃癌前病变的研究进展

4.现代医学对胃癌前病变的研究进展

综述参考文献

致谢

攻读学位期间发表的学术论文

参编著作

个人简历