复方蜥蜴散不同微粒组合剂对溃疡性结肠炎大鼠血清IL-4、结肠组织COX-2、MMP-9表达影响的研究

摘要

目的：
　　通过动物实验，观察复方蜥蜴散不同微粒组合剂（简称XY80目+100目）对溃疡性结肠炎（UC）大鼠血清IL-4含量、结肠组织COX-2和MMP-9表达水平的影响，揭示该方治疗UC可能的作用机制。
　　方法：
　　将84只SPF级SD雄性大鼠，在实验动物中心饲养7天后，随机分为：正常对照组（NC组）、模型对照组（MC组）、柳氮磺胺吡啶组（SASP组）、复方蜥蜴散80目治疗组（XY80目组）、100目治疗组（XY100目组）和80目+100目治疗组（XY80目+100目组），共6组，每组各14只。NC组大鼠采用生理盐水灌肠，其它组均采用三硝基苯磺酸（TNBS）-乙醇复合法诱导 UC模型。HE染色确定造模成功后，各组大鼠分别给予相应的药物灌胃治疗，均连续给药14天，观察大鼠一般情况的变化，进行DAI评分。治疗第14天末，将所有大鼠禁食24h，麻醉并处死后，光镜下观察大鼠结肠组织病理学改变，酶联免疫法（ELISA）检测血清IL-4含量，免疫组化法检测结肠组织COX-2和MMP-9的表达水平，并用统计学方法分析数据。
　　结果：
　　1.一般情况：在实验过程中，我们发现，NC组大鼠精神状态好，反应灵敏，被毛纯净整齐，体重增加较快，大便正常；MC组大鼠造模后第二天可发现精神状态变差，反应迟缓，扎堆不活动，食量显著减少，体重减轻，被毛蓬松凌乱，晦暗不光亮，大便稀溏甚则伴有粘液脓血；各治疗组和MC组相比较，以上表现均有不同程度的好转，精神状态改善，毛色光亮，反应灵敏，喜觅食，大便逐渐成形，以XY80目+100目组为最佳。
　　2.疾病活动指数（DAI）评分：各治疗组DAI评分与MC组同期比较，明显降低，差异显著，具有统计学意义(P<0.05)；SASP组、XY80目组、XY100目组DAI评分与XY80目+100目组同期比较，差异显著，具有统计学意义(P<0.05)；XY80目组、XY100目组与SASP组之间DAI评分同期比较，无统计学意义(P>0.05)。
　　3.病理组织学改变：行HE染色后放到显微镜下观察发现，NC组结肠黏膜完整无缺损，黏膜皱襞表面光滑，走向规则，腺体排列规整；MC组结肠黏膜各层组织结构消失，细胞间隙增宽，部分黏膜严重缺损，腺体破坏，大量嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞浸润到黏膜层和黏膜下层；各治疗组与MC组相比，结肠黏膜病理结果均有改善，以XY80目+100目组为最佳，各层结构基本清晰，可见散在的炎性细胞。
　　4.结果统计：各治疗组与MC组比较，血清IL-4含量明显升高，结肠组织COX-2和MMP-9的表达水平明显降低，有显著差异(P<0.05)；XY80目+100目组与其它治疗组比较，血清IL-4含量明显升高，结肠组织COX-2和MMP-9的表达水平明显降低，有显著差异(P<0.05)；SASP组、XY80目组、XY100目组三者之间比较，血清IL-4含量，结肠组织COX-2和 MMP-9的表达水平都没有差异(P>0.05)。经Pearson相关分析，COX-2与MMP-9表达呈正相关（P<0.05，相关系数r=0.969）。
　　结论：
　　1.复方蜥蜴散不同微粒组合剂能够使UC模型大鼠的一般情况及结肠黏膜损伤情况得到改善，并能降低DAI评分。
　　2.复方蜥蜴散不同微粒组合剂可以升高IL-4含量，降低COX-2和MMP-9的表达水平。
　　3.COX-2与MMP-9表达呈正相关，说明COX-2和MMP-9在溃疡性结肠炎的发生发展过程中具有协同作用。
　　4.复方蜥蜴散不同微粒组合剂的配方独特，其作用机制可能通过升高抑炎因子IL-4的含量，干预NF-κB信号通路的激活，降低炎症性相关酶COX-2和MMP-9的表达水平而抑制炎性介质表达，调节免疫失衡，减轻肠道的炎症反应，促使损伤的结肠黏膜修复。
　　5.复方蜥蜴散经不同微粒组合后可增强治疗效果，对结肠黏膜溃疡的修复作用明显，比单用80目微粒或单用100目微粒要好。

目录

声明

中英文缩略词表

前言

材料与方法

1.实验材料

2.实验方法

结果

1.各组大鼠的一般情况

2.各组大鼠的DAI评分

3.结肠黏膜病理学观察

4.血清IL-4检测结果

5.免疫组化统计结果

6.相关分析结果

讨论

1.溃疡性结肠炎造模方法

2.溃疡性结肠炎病因病机的探讨

3.复方蜥蜴散不同微粒组合剂分析与研究

4.IL-4、COX-2和MMP-9与溃疡性结肠炎的关系

5.复方蜥蜴散不同微粒组合剂对IL-4、COX-2、MMP-9的影响

结论

附图

参考文献

文献综述

致谢

攻读学位期间发表的学术论文

参编著作

攻读学位期间参加的学术会议

个人简历