生物膜对耐亚胺培南鲍曼不动杆菌中苯唑西林酶和AdeABC外排泵基因表达的影响

摘要

目的：
　　1、通过对OXA、AdeABC、CarO基因及生物膜形成在临床分离的亚胺培南耐药和敏感鲍曼不动杆菌中的分布特性的研究，进一步探讨鲍曼不动杆菌对亚胺培南的耐药机制。
　　2、通过生物膜对苯唑西林酶(OXA)和AdeABC外排泵基因表达的影响研究，揭示生物膜的形成对OXA和AdeABC外排泵相关耐药机制的影响，探讨生物膜在鲍曼不动杆菌对亚胺培南耐药方面的作用机制及作用方式。
　　方法：
　　运用多重PCR及PCR技术对2014年11月-2015年4月宁夏医科大学总医院临床分离并经鉴定和确认的106株亚胺培南耐药和102株亚胺培南敏感的鲍曼不动杆菌分别进行OXA、AdeABC、CarO基因的检测；采用微量滴定板法模拟生物膜在体内的生长制备生物膜模型及定量实验；实时荧光定量PCR技术对不同状态下OXA-23、AdeB基因表达量进行检测；E-test方法对产膜与非产膜菌株亚胺培南的最低抑菌浓度（MIC）进行测定。
　　结果：
　　1、OXA-23在亚胺培南耐药和敏感菌株中的检出率分别为99.1%和2.9%，经卡方检验P<0.05；在所有检测菌株中OXA-51基因均被检出，而OXA-58基因均未被检出；OXA-24基因仅在一株耐药菌株中检出。相反，AdeABC基因在耐药和敏感菌株分布具有较大差异，AdeA、AdeB、AdeC基因及三个基因共存在耐药菌株中的检出率均为98.1%（104/106），而敏感菌株中AdeA、AdeB、AdeC的检出率分别为64.7%（66/102）、82.4%（84/102）、66.7%（68/102），三个基因共存的检出率仅为64.7%（66/102），P<0.05。CarO基因的检出率较高，分别为97.2%（103/106）和99.0%（101/102），P>0.05。产生物膜菌株在亚胺培南耐药和敏感菌株中均具有较高的比重，分别为67.9%和75.5%,P>0.05。
　　2、106株亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌中产生物膜和不产生物膜菌株分别占67.9%和32.1%；生物膜状态下的菌株OXA-23、AdeB基因的相对表达量明显高于普通肉汤培养和浮游状态下基因的相对表达量（P<0.05）；产膜比非产膜菌株亚胺培南MIC更高，P<0.05结论鲍曼不动杆菌的生物膜形成能够促进OXA-23和AdeABC外排泵基因的表达，从而增强鲍曼不动杆菌对亚胺培南的耐药性。
　　结论：
　　1、OXA-51基因是所有亚胺培南耐药和敏感菌株共有的基因,OXA-23基因是除OXA-51外最流行的基因,是该医院耐亚胺培南鲍曼不动杆菌的最主要OXA亚型，提示其在鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素耐药机制中起到了重要的作用；AdeABC基因在耐药和敏感菌株分布具有较大差异，AdeABC外排泵在降低鲍曼不动杆菌对亚胺培南的敏感性，增强细菌耐药性方面起着重要作用；CarO基因几乎在全部菌株中被发现，外膜蛋白CarO的改变对于降低鲍曼不动杆菌对亚胺培南的敏感性的可能性不大；临床鲍曼不动杆菌所引发的的感染多数与生物膜的形成有关。
　　2、鲍曼不动杆菌的生物膜形成能够促进OXA-23和AdeABC外排泵基因的表达，从而增强鲍曼不动杆菌对亚胺培南的耐药性。

目录

声明

英文缩略词

一、前言

1.1 鲍曼不动杆菌

1.2 亚胺培南

1.3 鲍曼不动杆菌耐药机制

二、亚胺培南耐药与敏感鲍曼不动杆菌中OXA、AdeABC、CarO基因及生物膜的研究

2.1材料与方法

2.2 实验方法

2.3 结果

2.4 讨论

2.5 结论

三、生物膜形成促进临床耐亚胺培南鲍曼不动杆菌OXA-23和AdeABC外排泵基因的表达

3.1材料与方法

3.2 结果

3.3 讨论

3.4 结论

四、生物膜型鲍曼不动杆菌对其药敏的影响

1.1材料与方法

1.2 结果

1.3 讨论

1.4 结论

文献综述生物膜的形成在鲍曼不动杆菌耐药机制中研究进展

参考文献

致谢

攻读硕士学位期间发表论文及专利著作

个人简历