银川地区回汉绝经后妇女VDR受体基因多态性与骨密度及中医证型的相关性研究

摘要

不同民族具有不同的饮食文化及不同的地域特点、不同的生活习惯，所以造就了一些疾病表现在不同民族及地域的不同，而骨质疏松疾病作为慢性老年性代谢性疾病的一种，如今发病趋向于明显的上升；尤其以妇女月经结束后发生骨质降低人数明显多于男性，目前国内外对不同民族、不同地区的骨密度与维生素D水平的多态性及不同民族饮食、运动、年龄、及绝经年龄等做了相关性的研究，发现有些不同民族及地区维生素D水平的多态性与骨密度及年龄、饮食习惯、运动等具有差异性，而宁夏作为全国回族自治区的省份，回族生活具有独特的饮食、文化习惯及不一样的民族地域风情，故本课题从回汉不同民族的绝经后妇女来开展，研究回汉这两种民族的维生素受体表达程度的多态性及与中医学上证型的不同性。
　　本试验主要分为以下两部分：
　　1.搜集及筛选回汉绝经后妇女的一般资料及骨密度和中医证型的分析
　　2.在以上筛选好的研究资料中研究不同民族VDR受体基因多态性与骨密度及中医证型的相关性
　　目的：
　　1.研究回汉不同民族已绝经女性骨量的差异性及可能的影响因素。
　　2.探讨回汉不同民族绝经后妇女维生素D受体基因多态性的水平与骨密度、中医证型的相关性。
　　方法：
　　选取宁夏医科大学附属总医院门诊及骨密度门诊办的患者，时间在2015年7月至2016年5月的回汉绝经后妇女120例为研究对象，回汉各60例，采用随机、单盲和对照的实验设计办法，受试人群按照骨密度含量编为四组，分别为回族正常组、回族骨质疏松组、汉族正常组、汉族骨质疏松组4组，每组各30例，并进一步做调查问卷，询问其饮食习惯、运动、绝经年龄等信息，并请副主任医师以上依据患者症状体征进行中医证型分析。并对不同民族不同骨密度及中医证型进行对比究。在宁夏医科大学总医院门诊及体检办筛选符合样本需求的绝经后妇女，回汉各60例，并填写临床调查表，测量L2-L4骨密度值，并取其均值，分析中医证型，完成血液样本的采集、-80℃冰箱冻存，经PCR、电泳、基因测序后分析其基因多态性，并分析统计不同民族的基因多态性的水平是否有差异；分析其遗传基因性与骨含量的相关性及与中医证型的关联性。
　　结果：
　　1.回汉绝经后妇女正常组、疏松组之间骨密度含量无明显性差异P>0.05。
　　2.回汉绝经后妇女正常组患者骨密度与中医证型之间无明显显著性差异。Χ2值为0.230，P=0.973>0.05；回汉绝经后妇女疏松组患者骨密度含量与中医学证型之间无明显显著性差异。Χ2值为0.825，P=0.843>0.05，按ɑ=0.05的水准。
　　3.VDR Fokl等位基因在银川汉族绝经后女性正常组基因检测频率为63.3%、36.6%，和疏松组基因检测频率为55.0%、45.0%，Χ2值为1.226，P=0<0.05，银川回、汉族绝经后妇女正常组与疏松组在等位基因点上具有差异性，说明回、汉族疏松组与正常组在纯合子基因上表达有差异，即所携带的纯合子（C、T）基因数量不同。
　　4.说明银川地区回汉绝经后妇女维生素D受体Fokl位点基因存在有差异。P=0<0.05。
　　5.银川回汉地区绝经后妇女VDR受体基因多态性中Fokl位点SNP基因型的骨密度在汉族绝经后女性和回族绝经后妇女对比差异有统计学意义P=0.009<0.05，即证明含有CC基因型的回族绝经后女性骨密度比汉族绝经后女性高。
　　6.本次实验研究发现银川地区汉族绝经后妇女疏松组中医证型分型与维生素D受体三种基因型与之间无相关性性差异（Χ2=5.931，P=0.052>0.05），而在汉族疏松组、回族疏松组以及回族正常组之间均有明显相关性（P<0.05），说明在汉族绝经后妇女骨质疏松患者与维生素D受体基因之间未见有明显的相关性，在另外三组中可见相关性，说明具有有些遗传基因或者携带的不同基因所致，这个是值得我们后期去探讨的一个问题。
　　结论：
　　1.回、汉肾阳虚型分别均占（37%、30%），其次为肝肾阴虚型，分别占23%、27%，气滞血瘀型少见，从中能够看出骨质疏松组样本以肾阳虚型最为多见。
　　2.本实验研究表明:回汉绝经后妇女正常组患者骨密度与中医证型之间无明显显著性差异。Χ2值为0.230，P=0.973>0.05；回汉绝经后妇女疏松组患者骨密度与中医证型之间无明显显著性差异。Χ2值为0.825，P=0.843>0.05，按ɑ=0.05的水准。可认为在骨密度水平上回汉绝经后妇女无明显差异，这可能与样本量小有关、或者调查统计中出现误差，或者回汉民族共处一地时间久而生活习惯相似亦有可能。
　　3.银川回汉地区绝经后妇女VDR受体基因多态性中Fokl位点SNP基因型的骨密度在汉族绝经后女性和回族绝经后女性比较差异有统计学意义P=0.009<0.05，即携带CC基因型的回族绝经后女性骨密度比汉族绝经后女性高。
　　4.银川地区回汉绝经后妇女骨密度与中医证型无明显相关性，考虑其不同民族生活方式和生活环境都差异或者具有遗传性不同。
　　5.银川地区回汉绝经后妇女疏松组骨密度之间、正常组之间均无明显差异。
　　6.本次实验研究发现银川地区汉族绝经后妇女疏松组中医证型分型与维生素D受体三种基因型与之间无相关性性差异（Χ2=5.931，P=0.052>0.05），而在汉族疏松组、回族疏松组以及回族正常组之间均有明显相关性（P<0.05），说明在汉族绝经后妇女骨质疏松患者与维生素D受体基因之间未见有明显差异，在另外三组中可见相关性，说明具有有些遗传基因具有不明显的趋势，可能与样本量小有关等，这个是值得我们后期去探讨的一个问题。
　　7.银川地区回汉绝经后妇女之间正常组、疏松组之间的维生素D受体基因的等位基因具有差异性。
　　本研究样本量较小，代表范围小，但可以为以后的大样本数据研究做前期的铺垫与准备工作，为少数民族发展及防治可作出相应的贡献，可通过加大样本量，从特定的区域收集少数民族的数据，对我们研究各少数民族与汉族的骨质疏松的发病机制、遗传因素和防治的不同点有重要意义。

目录

声明

中英文缩略词汇表

前言

1.骨质疏松与骨密度的关系

2.中医对OP的阐述

3.国内外研究现状

材料与方法

1.临床资料

2.病例分组与研究方案

3.维生素D受体基因多态性的检测

4. 实验方法

5.统计学方法

结果

1试验结果

讨论

1.维生素D受体的遗传基因及中医学分型

2.VDR多态性与不同民族骨密度的关系

3.维生素D在人体中的作用及意义

4.不同民族之间维生素D水平的区别

5.不同民族之间VDR的分布差异

6.VDR与维生素D水平的关系

结论

参考文献

综述:浅谈中医药防治骨质疏松的研究进展

致谢

攻读学位期间论文发表情况

个人简历

患者知情同意书

附表Ⅰ临床调查表