宿主细胞内SARS-CoV S蛋白和N蛋白的初步筛选和鉴定

摘要

SARS冠状病毒(SARS-CoV)为一种新发现的冠状病毒,可导致人的严重急性呼吸综合征(severe acute respiratory syndrome,SARS)。目前发现的SARS-CoV结构蛋白包括S蛋白、N蛋白、M蛋白和E蛋白,其中S蛋白和N蛋白在病毒复制中发挥着重要作用。S蛋白决定病毒组织嗜性,参与病毒侵入过程,介导病毒在细胞之间的传播,还可引起宿主细胞凋亡。已确定血管紧张素转换酶2(angiotensin converting enzyme 2,ACE2)是SARS-CoV的功能性受体,CD209和CD209L可能是其替代受体。内吞体蛋白酶Cathepsin L可切割S蛋白促进SARS-CoV的侵入。研究表明,N蛋白主要分布于细胞质,也可分布于核仁内。N蛋白主要参与SARS-CoV核衣壳的形成、基因组RNA合成调控、亚基因组RNA转录和翻译,还通过破坏细胞分裂抑制宿主细胞增殖或延缓细胞生长。细胞内已发现的N蛋白结合蛋白包括hnRNP A1、14-3-3蛋白、cyclin-CDK复合物、泛素相关小修饰蛋白(small ubiquitin-related modifier,SUMO)和亲环素A(Cyclophilin A)等。从基因组和蛋白质组的角度和已有细胞信号传导的知识来看,这些已知蛋白质与S蛋白或N蛋白的相互作用可能只是这两种蛋白功能的“冰山一角”,目前并不能完全解释这两种蛋白的全部功能,因此通过适当的技术筛选宿主细胞内与S蛋白或N蛋白结合的其它蛋白,对于进一步阐明两种蛋白的功能具有重要的意义。

目录

摘要

缩略语说明

前言

第一单元 宿主细胞内SARS-CoVS蛋白结合蛋白的筛选及初步鉴定

材料

方法

结果

讨论

单元小结

第二单元 宿主细胞SARS-CoVN蛋白结合蛋白的筛选

材料

方法

结果

讨论

单元小结

参考文献

致谢

攻读博士学位期间发表文章