山东链霉菌的扩大发酵与抗菌活性物质的提纯分析

摘要

从土壤中筛选抗生菌的过程中，得到一株产广谱、高活性抗真菌物质的链霉菌24[＃]，通过测定抗菌谱，发现其对30余种植物病原真菌有显著拮抗作用，其次生代谢产物对病菌菌丝有断裂、扭曲、缢缩等致畸效应。根据16SrDNA序列分析和菌株形态特征、培养特征、细胞壁化学组分及生理生化特性等实验结果，将该菌株命名为：山东链霉菌(Streptomyces，thennocarbonxydus var shandaensis)。 本文对山东链霉菌进行扩大发酵试验及大鼠急性毒性试验和对其所产抗真菌活性成分进行提纯和理化性质分析。首先对山东链霉菌进行扩大发酵，按照低成本高活性的原则，进行培养基优化，确定最适培养基组成，同时进行中试发酵，检测中时发酵的各项指标，为实际生产奠定了理论基础。 通过大鼠急性毒性试验，采用霍恩氏法以10000mg／kg·bw灌胃染毒，14天后大鼠正常生长，无一死亡，按照现行农药标准属于低毒物质，按照实际加样量，属于无毒物质。 同时进行了山东链霉菌所产抗真菌活性成分的提纯与理化性质分析。首先通过有机溶剂萃取试验对活性成分进行粗提，然后通过硅胶柱层析进行除部分里去除色素。在根据抗菌素活性成分的酸碱性特点采用阴离子树脂DEAE-Sephrose 浓度梯度洗脱，获得了有效组分的盐溶液。溶液在通过半透膜透析试验后大体估测了抗生素活性成分分子大小，利用G-25分子筛除盐精制收集活性物质。经过 HPLC测定，获得峰形左右对称的单峰。经真空低温冻干，获得淡黄色粉末纯品，经过红外、紫外、质谱、核磁共振、元素分析等光谱仪器分析了其结构组成及分子式。

目录

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摘要

前言

第一章培养基优化与扩大发酵

第二章抗菌物质的动物急性毒性试验

第三章抗菌活性物质分离纯化

参考文献

致谢

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