蒙药复方四味土木香散血中移行成分及其抗氧化活性研究

摘要

目的:研究四味土木香散血中移行成分及其血清药理作用。
　　方法:(1)给药样品的制备及其一致性和稳定性检查:①按《中国药典》(2010年版)各药材项下含量测定方法对原料药材进行含量测定;②确定四味土木香散冻干粉的制备工艺并建立其指纹图谱;③按《中国药典》（2010年版）四味土木香散项下含量测定方法对四味土木香散冻干粉中异土木香内酯、土木香内酯进行含量测定。(2)建立四味土木香散血中移行成分的分析方法:①采用液-液萃取法、固相萃取法及有机溶剂沉淀法对血清样品预处理方法进行筛选;②利用紫外分光光度法测定经4倍甲醇、乙腈处理后蛋白质的含量;③取给药30-180min后的大鼠经肝门静脉、腹主动脉采集的含药血清，采用有机溶剂沉淀法，利用HPLC法确定最佳采血时间点。(3)采用UPLC-Q-Exactive/MS法鉴定来源于药物的血中移行成分。(4)以不同浓度四味土木香散冻干粉经口给药后的含药血清为研究对象，采用FRAP法测定四味土木香散含药血清的总抗氧化活性。
　　结果:(1)在原料药材合格的基础上，制备了给药用四味土木香散冻干粉，其各批次HPLC指纹图谱相似度均在0.9以上，同时测定了四味土木香散冻干粉中异土木香内酯、土木香内酯的含量，分别不低于0.30 mg/g、0.41 mg/g;(2)对血清样品预处理方法进行了筛选，并比较了经4倍甲醇与乙腈处理后蛋白质的含量测定，结果两种沉淀方法均能将血清中90％以上的蛋白质除去，在最佳采血时间点的选择中用此两种方法进行血清样品的前处理，确定给药90min后经肝门静脉采血乙腈沉淀处理方法为最佳入血成分分析方法;(3)共鉴定了来源于四味土木香散中的11个入血成分，并进行了归属。(4)比较了不同浓度给药样品的抗氧化活性，结果显示四味土木香散冻干粉的给药浓度在0.8-1.6g/ml之间的含药血清均有抗氧化活性，且给药浓度与其抗氧化活性呈量效关系。
　　结论:本实验通过四味土木香散血中移行成分及其血清药理作用的研究，从大鼠含药血清中共鉴定了11个入血成分，该11个血中移行成分均来源于四个单味药。结合药效学验证，结果显示含药血清中有抗氧化活性的有效成分群，推测其可能为四味土木香散抗氧化活性的体内直接作用物质。此研究结果为蒙药复方四味土木香散血清药物化学的深入研究奠定了基础，为阐明四味土木香散的药效物质基础、药理作用及其作用机制提供了一定的科学依据。

目录

摘要

1 绪论

第一章 文献综述

1 蒙药复方四味土木香散的概述

1．1 单味药化学成分及药理作用研究进展

1．2 四味土木香散化学成分的研究进展

1．3 四味土木香散药理作用的研究进展

2 中药血清药物化学概述

2．1 中药血清药物化学研究方法的提出

2．2 中药血清药物化学的理论基础及研究范畴

2．3 中药血清药物化学在单味中药及复方中药研究中的应用

2．4 中药血清药物化学对现代中药研究的应用一

3 展望

第二章 给药样品的制备和四味土木香散冻干粉的质量控制

第一节 原料药材的含量测定

第二节 四味土木香散冻干粉的制备工艺研究

第三节 四味土木香散冻干粉中指标性成分的含量测定

第三章 建立四味土木香散血中移行成分的分析方法

第一节 血清样品的预处理

第二节 甲醇、乙腈沉淀处理后的蛋白质含量测定

第三节 最佳采血时间点的确定

第四章 四味土木香散含药血清的UPLC-Q-Exact i ve／MS鉴别

第五章 四味土木香散含药血清的抗氧化研究

第六章 总结与展望

参考文献

致谢

作者简介

声明