茶多酚及其单体EGCG的分离纯化研究

摘要

1.综述了茶多酚、儿茶素单体以及茶多糖的提取分离、分析检测和应用现状，并对各种提取分离方法和检测方法的优缺点进行了比较。 2.通过单因子实验和正交实验，确立了溶剂萃取茶多酚的最佳工艺条件为：1)茶叶粒度22～80目，茶叶(g)：水(m1)=1:20，温度70℃，在搅拌条件下浸提2次，每次45min，合并水浸提液；2)将水浸提液浓缩至固含量约为5％；3)振荡条件下用等体积乙酸乙酯萃取分离两次，每次60min，合并萃取液；4)50℃下减压蒸馏；5)-40℃真空条件下冷冻干燥。 3.为了提高茶多酚的提取率，研究了不同辅助方法对溶剂萃取茶多酚的影响。实验结果显示，辅助浸提方法有助于茶多酚的提取，其中微波辅助萃取的效果最好。采用微波中档火力，分两次浸提，每次4min，TP的浸提率为79.80％，实际得率为23.21％，且产品的纯度为83.71％。 4.为了提高茶多酚粗品的纯度，研究了DM-130树脂对茶多酚的吸附和解吸性能，并确立最佳工艺参数为： 1)吸附时，茶多酚的上样浓度为10mg/ml，流速为4ml/min； 2)洗脱时，用80％(V/V)乙醇进行洗脱，流速2mL/min，pH=3.0。原料茶多酚的含量可由76.85％提高到95％。 5.EGCG的分离纯化，研究了Sephadex LH-20对儿茶素单体的吸附和解吸性能，主要包括： 1)溶剂浓度对静态吸附和解吸的影响，结果显示蒸馏水是EGCG和ECG单体的理想吸附溶剂，无水乙醇为最佳解吸溶剂，40％(V/V)乙醇可以将EGCG和ECG分开。 2)动态吸附和洗脱实验，发现静态吸附比动态吸附要好，所以采用蒸馏水静态吸附和无水乙醇动态洗脱相结合的方法分离纯化儿茶素单体，静态吸附至稳定后进行动态洗脱，洗脱液流速0.6～0.8ml/min，收集到富含EGCG和ECG的流分浓缩后，再次上凝胶柱吸附，然后用40％(V/V)乙醇溶液洗脱分离EGCG和ECG，可得到纯度大于98％的高纯度儿茶素单体EGCG。 3)葡聚糖凝胶Sephadex LH-20使用寿命的研究，通过凝胶使用次数的考查，发现重复使用五次对儿茶素各单体组分的吸附量和解吸率基本上没有影响。 6.茶多酚很容易被氧化，为了找出其最佳的储存条件，对茶多酚在不同储存条件下的稳定性进行了研究，确定了茶多酚的储存条件为-10℃下避光冷藏。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：符号说明

声明

第1章绪论

1.1茶多酚

1.1.1茶多酚的化学成分和结构

1.1.2茶多酚的理化性质

1.3茶多酚的功能

1.1.4茶多酚的应用

1.1.5茶多酚的提取分离方法

1.1.6茶多酚总量的分析测定方法

1.2儿茶素单体

1.2.1儿茶素单体的分离纯化方法

1.2.2儿茶素单体的分析检测方法

1.3茶多糖

1.3.1茶多糖的组成

1.3.2茶多糖的理化性质

1.3.3茶多糖的药理作用

1.3.4茶多糖的提取分离

1.3.5茶多糖的纯度检测

1.4本课题研究内容的提出

1.4.1研究的目的意义

1.4.2本论文研究内容的提出

1.4.3主要研究内容

第2章茶多酚的提取分离

2.1实验准备

2.1.1实验原料

2.1.2实验试剂

2.1.3实验仪器

2.2实验

2.2.1工艺流程

2.2.2分析检测方案的选定

2.2.3溶剂萃取实验条件的选择

2.2.4正交实验

2.2.5单因素分析

2.2.6茶多酚辅助浸提方法

2.3本章小结

第3章DM-130树脂分离纯化茶多酚粗品的研究

3.1实验原理

3.2实验步骤

3.2.1茶多酚原料分析

3.2.2树脂的预处理

3.2.3静态吸附实验

3.2.4静态解吸实验

3.2.5动态吸附实验

3.2.6动态洗脱实验

3.3本章小结

第4章EGCG单体的分离纯化

4.1儿茶素单体检测方法的建立

4.1.1检测方案

4.2 Sephadex LH-20的静态吸附与解吸研究

4.2.1 Sephadex LH-20简介

4.2.2最大吸附量的测定

4.2.3静态吸附实验

4.2.4静态解吸实验

4.3 Sephadex LH-20的动态吸附与洗脱研究

4.3.1动态吸附实验

4.3.2动态洗脱实验

4.4 Sephadex LH-20的使用寿命研究

4.4.1吸附实验

4.4.2解吸实验

4.5本章小结

第5章稳定性实验

5.1非避光储存

5.2避光储存

5.3盐析避光储存

5.4低温避光储存

5.5本章小结

第6章结论

参考文献

致谢