苗勒管发育异常患者HOXA13基因突变研究

摘要

背景：苗勒管发育异常主要表现在女性生殖道畸形及伴或不伴泌尿、骨骼等多系统的畸形。生殖器官的发育起源于苗勒管，两条苗勒管从开始发育到完全融合形成子宫阴道管，是一个非常复杂的过程，包括细胞的分化、融合以及某些基因的调控，同时还受外界环境及母体激素水平的影响，其中某一环节出现异常就会导致生殖器官出现不同发育程度的异常表型。女性生殖器官先天发育异常表型表现多样，分类情况也十分复杂，根据苗勒管的发育程度和融合程度，可分为先天性无阴道无子宫（Congenitalabsenceofuterusandvagina，CAUV）、始基子宫、幼稚子宫、单角子宫、双角子宫、双子宫和纵隔子宫等。苗勒管发育的异常导致的原发或继发闭经、不孕、反复流产及早产等危害，已经严重影响女性的身心健康，因此越来越受到国内外学者的注意。虽然国内外学者对苗勒管发育异常的遗传学进行了大量研究，HOX基因因在胚胎形态形成过程中起重要，一直是苗勒管发育异常的重要候选基因。HOXA13作为HOX基因家族中的一员，位于A种簇5'端，包括一个内含子和两个外显子，其中第二号外显子包含一个属于基因编码区域的同源结构域。有研究发现HOXA13表达在阴道上段，并且HOXA13在子宫等生殖器官的发育过程中起了重要作用。Mortlock等[1]对伴有相似畸形的手一足一生殖器综合征(hand-foot-genitalsyndrome，HGFS)家系进行相关基因检测，发现HOXA13基因确实存在突变，该突变表现在:一号外显子两个突变，二号外显子一个突变，但都是无义突变。在小鼠研究中，发现HOXA13基因敲除的小鼠远端苗勒管不发育，其第二个外显子编码区突变可导致HGFS，目前在5个以上此病家族中找到其突变[2]。随后国内外学者对HOXA13基因的第二号外显子编码区进行突变筛查均未发现突变，为此我们扩大样本量进一步对HOXA13基因的第二号外显子编码区筛查基因突变，同时对苗勒管发育异常的相关性进行了研究。
　　 目的：分析苗勒管发育异常患者中HOXA13基因的第二号外显子编码区是否存在突变。
　　 方法：收集苗勒管发育异常患者共348例（包括17例CAUV患者、9例始基子宫患者、6例幼稚子宫患者、110例单角合并或不合并残角子宫患者、72例双角子宫患者、70例子宫融合不全患者、64例双子宫合并或不合并双宫颈或双阴道患者），初次确诊后抽取患者的外周静脉血，分离提取DNA，经过聚合酶链反应(PCR)扩增出HOXA13基因第二号外显子编码区后，自动化测序分析HOXA13基因第二号外显子编码区，与NCBI数据库上提供的人类正常序列进行对比，分析HOXA13基因的第二号外显子是否存在突变。
　　 结果：苗勒管发育异常患者中HOXA13基因的第二号外显子编码区直接自动化测序，与NCBI数据库上提供的人类正常序列进行对比，在所有患者中均没有突变发生。
　　 结论：本中心苗勒管发育异常患者可能与HOXA13基因的第二号外显子编码区突变无明显关系，还需进一步的深入研究苗勒管发育异常的发生原因。

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