叶酸修饰姜黄素结肠靶向自微乳给药系统的研究

摘要

姜黄素是从姜科姜黄属植物姜黄的植物根茎中提取的一种天然有效成份，具有抗多种肿瘤活性的作用，如结肠癌、十二指肠癌、食道癌、贲门窦癌、胃癌、肝癌、胸腺癌、白血病、口腔癌和前列腺癌等。临床I期试验证明姜黄素治疗结直肠癌是安全有效的。尽管作为化疗药的姜黄素在治疗结肠癌方面有很多潜在优势，但是姜黄素自身也存在很多缺陷，如水溶性低、首过效应强以及口服吸收差等。本文通过将姜黄素制成叶酸修饰自微乳结肠定位释药胶囊制剂达到提高姜黄素的溶解度和改善其对结肠癌的治疗作用;自微乳制剂从胶囊释放后在结肠中水的作用下形成微乳，利用与结肠粘膜或结肠癌细胞表面高度表达的叶酸受体的结合作用，将药物通过内吞进入体内，以促进其口服吸收或提高其治疗作用。
　　 本文测定了姜黄素在不同油相、表面活性剂和助表面活性剂的溶解度，选择对姜黄素溶解度较高的辅料并通过三元相图筛选出自微乳处方所用的油相、表面活性剂和助表面活性剂;以溶解度和粒径为指标用单纯形网格法确定了各组分比例，优化处方为:表面活性剂(Cremophor EL):57.5％，助表面活性剂(Transcutol HP):32.5％，油相(Capryol90):10％。
　　 将叶酸-聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、叶酸-聚乙二醇-胆固醇半琥珀酸酯与叶酸-聚乙二醇-胆固醇分别作为表面活性剂，加入到自微乳优化处方中，利用大鼠在体结肠循环考察了结肠粘膜对叶酸修饰的自微乳制剂的吸收率，结果表明当制剂中加入的叶酸-聚乙二醇-胆固醇半琥珀酸酯与Cremophor EL的比值为1∶100时能显著增加大鼠结肠粘膜对姜黄素的吸收。
　　 取适量叶酸修饰姜黄素自微乳用蒸馏水稀释后得到的微乳，在透射电镜下观察液滴呈球形，形态规则，无黏连。平均粒径为31.1nm，zeta电位为-6.56mV。体外释放实验表明叶酸修饰姜黄素自微乳结肠溶胶囊能在结肠部位释放姜黄素。
　　 采用荧光显微镜和流式细胞术考察叶酸修饰自微乳制剂靶向肿瘤细胞的能力，结果均表明叶酸修饰的自微乳制剂可通过叶酸受体介导的内吞作用靶向肿瘤细胞。
　　 在大鼠药代动力学实验中，采用高效液相色谱法检测大鼠血浆中姜黄素的含量，用DAS2.0药代动力学软件处理，计算药物动力学参数(AUC，MRT和t1/2等)。结果表明大鼠口服叶酸修饰姜黄素自微乳结肠靶向胶囊的曲线下面积大于姜黄素自微乳结肠靶向胶囊组，半衰期延长，叶酸修饰的姜黄素自微乳结肠靶向胶囊达峰时间为8.3h，长于姜黄素自微乳结肠靶向胶囊组的6.2h。叶酸修饰姜黄素自微乳相对于姜黄素自微乳的生物利用度为149.2％，说明叶酸脂质材料的加入使得姜黄素的口服吸收显著提高。