声明
摘要
第一章 绪论
1.1 DNA简介及其检测的意义
1.2 目前的DNA检测技术
1.2.1 标记型
1.2.2 无标记型
1.3 检测DNA中的放大技术
1.3.1 核酸体外扩增技术
1.3.1 检测物信号放大技术
1.4 展望
参考文献
第二章 基于磁球放大技术的电化学发光法检测细胞中mRNA
2.1 前言
2.2 实验部分
2.2.1 材料与试剂
2.2.2 实验仪器
2.2.3 三联吡啶钌N-羟基琥珀酰亚胺酯的合成
2.2.4 荧光检测MBs上的Ru(bpy)32+-NHS
2.2.5 链霉亲和素修饰的96孔板包被DNA复合物
2.2.6 SA-MBs结合至基底上的B-DNAp,释放并标记上Ru(bpy)32+-NHS;用CNTs包被Ru(bpy)32+-NHS-MBs
2.2.7 ECL和ECL光谱检测
2.2.8 检测细胞中β2M的基因表达
2.3 结果与讨论
2.3.1 ECL光谱法检测人乳腺癌细胞中β2M mRNA含量
2.3.2 基于CNTs包裹MBs ECL方法检测细胞中β2M的基因表达水平
2.4 结论
参考文献
第三章 基于磁球表面DNA杂交-去杂交信号放大荧光检测DNA
3.1 前言
3.2 实验部分
3.2.1 材料与试剂
3.2.2 实验仪器
3.2.3 制备DNAp修饰的MBs
3.2.4 磁球表面B-DNAp和Cy5-DNAd杂交-去杂交反应
3.2.5 t-DNA与B-DNAc和DNAp-MBs的结合
3.2.6 DNAp-MBs的释放及其杂交-去杂交反应
3.2.7 Cy5-DNAd-DNAp-MBs落射荧光成像
3.2.8 定量细胞中RPLP2 mRNA
3.3 结果与讨论
3.3.1 磁球表面B-DNAp和Cy5-DNAd杂交-去杂交反应
3.3.2 定量检测t-DNA
3.3.3 人乳腺癌细胞中RPLP2 mRNA的测定
3.4 结论
参考文献
第四章 基于多色编码微珠单分子检测多种DNA技术及其应用
4.1 前言
4.2 实验部分
4.2.1 材料与试剂
4.2.2 实验仪器
4.2.3 多色磁球的制备
4.2.4 编码磁球的荧光成像
4.2.5 降解mRNA得到单链cDNAs
4.2.6 多编码MBs定量检测cDNAs
4.3 结果与讨论
4.3.1 多色编码微珠单分子检测细胞中多种DNA及其多基因表达
4.4 结论
参考文献
致谢
攻读学位期间发表学术论文
山东大学;