弓形虫眼病小鼠模型的建立及实验研究

摘要

研究背景:
　　弓形虫病是全球分布的人兽共患的疾病，是弓形虫引起的全身性感染性寄生虫病。弓形虫病具体是由刚地弓形虫引起的，刚地弓形虫是一种能够感染人和温血动物的细胞内寄生虫，在大自然中作为一个人兽共患病原菌广泛的存在。据统计，全世界大约有三分之一的人类慢性感染弓形虫病。疾病的患病率和感染的来源在不同的地理区域各不相同，与不同的气候、饮食习惯和卫生状况等有关。弓形虫眼病是弓形虫对眼组织的损害所引发的疾病，国内目前对该病认识较少，弓形虫感染导致的弓形虫眼病的发病机制尚不十分清楚，相关的基础研究更是罕见。国外对该病的研究，大多集中在对本病急性感染的研究，而对于慢性感染研究较少。慢性感染弓形虫眼病后，眼底改变如何发展和演变，临床医师对于本病的了解有限，所以，找到一个良好的方法建立弓形虫眼病慢性感染模型，能够很好的观察眼底变化，从而为弓形虫眼病的诊断与治疗提供一定的依据，研究拟通过口服感染的方法建立弓形虫眼病的小鼠模型，模拟小鼠弓形虫慢性感染过程，并观察其眼和病理改变，为进一步研究提供一定的依据。
　　研究目的:
　　建立弓形虫眼病的小鼠模型并观察其眼底改变和病理特征，为进一步研究弓形虫眼病的发病机制，制定弓形虫眼病的早期干预措施提供一定依据。
　　研究方法:
　　将20只BALB/C小鼠随机分为对照组10只和实验组10只，实验组小鼠经口给予Ⅱ型弓形虫PRU虫株（弱毒株）包囊，模拟弓形虫慢性感染过程，每天观察小鼠眼底情况，在1个月后，2个月后，3个月后分别给两组小鼠做眼底照相以及眼底荧光素血管造影，观察小鼠眼底改变，3个月后ELISA法检测小鼠血清IgG，然后处死小鼠取眼球做石蜡切片，HE染色和免疫组化染色后观察视网膜及脉络膜损害情况。
　　研究结果
　　实验组小鼠两周后即可观察到眼底出现明显炎症表现，视盘边界不清，视网膜血管充盈，视网膜水肿、出血，由视盘区开始逐渐向周边血管扩展，并随时间延长逐渐加重。眼底荧光素血管造影显示实验组小鼠视网膜静脉充盈扩张荧光素着色，毛细血管网破坏，荧光素渗漏，并见血管无灌注区，并随时间延长，逐渐加重，血清IgG出现明显高滴度变化，显著高于对照组(p＜0.001)，视网膜及脉络膜组织切片，可见视网膜及脉络膜明显出现水肿改变，组织间间隙明显疏松，有腔隙形成，视网膜及脉络膜组织可见炎症细胞浸润，在实验组小鼠的视网膜组织切片中，发现了特异性染色的弓形虫包囊。
　　研究结论:
　　通过经口给予Ⅱ型弓形虫PRU虫株可以建立小鼠弓形虫眼病模型，证明了获得性弓形虫病也可以引起视网膜血管充盈，视网膜水肿、出血等视网膜及脉络膜炎症表现。实验组小鼠血清IgG产生了体液免疫应答。为弓形虫眼病的深入研究奠定了基础。

目录

声明

摘要

符号说明

前言

材料与方法

1．材料

2．方法

3．统计学处理

结果

1．模型建立

2．眼底改变

3．FFA变化

4．血清IgG变化

5．病理变化

6．免疫组化染色结果

讨论

结论

附图

参考文献

致谢

攻读学位期间发表的学术论文

综述 弓形虫眼病